红曲粉中桔霉素的测定方法
时间：2022-01-04 阅读：1192
红曲粉，是一种天然红色素，它在食品工业中应用十分广泛，南方做烧肉或豆腐乳多使用。红曲是用糯米蒸制后接种红曲菌种，发酵繁殖的，产品是发酵后的暗红色糯米，经粉碎后成为红曲粉。
红曲粉易受潮，一旦受潮，就会逐渐霉变，红曲霉毕竟是霉菌，它产生的代谢物远不止红曲色素一种，极易产生桔霉素。
很早以前就有人发现红曲有抑菌能力，大约在20年前，法国科学家鉴定出了红曲霉产生的桔霉素，后来又发现很多红曲霉都会产生这种物质。
桔霉素是一种真菌毒素，虽然其毒性比huang曲霉素逊色不少，但仍然可能具有肾脏毒性和致癌、致畸作用。2017年10月27日，世界卫生组织国际癌症研究机构公布的致癌物清单初步整理参考，桔霉素在3类致癌物清单中。
随后，日本、美国、欧盟等国家和地区开始限制中国红曲产品的出口。
后来中国食品工业界开始筛选不产生桔霉素的优秀红曲霉菌种，同时通过改进生产工艺减少桔霉素的产生。
目前已经基本解决了这个历史遗留问题，中国的国家标准也对红曲色素中的桔霉素作出了*规定。固态样品桔霉素限定值为1mg/kg，液态样品桔霉素限定值为50ug/L。
检测方法参考国家标准GB5009.222-2016
以下物品用于测定样品中的桔霉素(HPLC-荧光法)
序号 | 货号 | 产品名称 |
1 | IAC109 | clover桔霉素亲和柱,1ml,25支/盒 |
2 | 桔霉素固体标准品 1mg | |
3 | 桔霉素液体标准品 1ml | |
4 | G1112C | Clover 10倍浓度0.1%PBS缓冲液，150ml/瓶 |
5 | G1113C | Clover 10倍浓度PBS缓冲液，150ml/瓶 |
6 | 31955C | Clover 玻璃纤维滤纸，100张/盒 |
7 | 31240C | Clover 折叠式槽纹滤纸，100张/盒 |
8 | 31967 | 试管擦拭纸，280张/盒 |
9 | C546150-U | ODS C18 色谱柱，4.6*150mm，5um |
10 | 34000C | Clover无荧光测试管，250支/包，长75mm |
11 | 34010 | 10ML玻璃注射器筒(定量管毒素专用） |
12 | 36020 | 塑料漏斗10个/包 |
13 | ZJ0612 | Clover 12位泵流操作架一套 |
14 | 20202 | 1.1升不锈钢均质杯均质器，22000转/min，带定时功能 |
检测原理
将样品与提取液混合、匀浆、过滤，然后将滤液过CitriTestTM HPLC柱科乐福clover桔霉素亲和柱（货号IAC109），柱内含桔霉素的特异性抗体。随即，桔霉素将键合在分离柱中的抗体上。然后通过淋洗，去除免疫亲合柱上的杂质。随后使用洗脱液过柱，将桔霉素从抗体上分离下来。从柱中流出的洗脱液随即注入HPLC系统进行检测分析。
主要优点
专属--专门用于HPLC，UPLC或MS-HPLC
稳定--保质期长，18个月
快速--处理一个样品约20分钟
范围--10-500ppb
应用--红曲及其制品，玉米，大米，辣椒等
桔霉素标准溶液(100ng/mL)的液相色谱图
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