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可的松ELISA检测试剂盒(酶联免疫法)
ELISA操作孵育过程常见问题及解答
1) 孵育时未贴封片或加盖,使标本或稀释液蒸发,吸附于孔壁,难于清洗*;
2) 孵育时间人为延长,导致非特异性结合紧附于反应孔周围,难以清洗*。
3)孵育温度未按照说明书要求进行,温度过高或过低;
解决办法:
1) 贴封片或加盖;
2) 按说明步骤严格控制操作时间和孵育温度。
通用名称:可的松检测试剂盒(酶联免疫法)
英文名称:Urinary Cortisol
公司品牌:德国DRG
产品货号:EIA-2989
产品规格:96T
检测样本:尿液
储存条件:2—8℃
检测方法:ELISA方法
预期用途:仅用于科研,体外检测使用
参考价格:询价
供应商家:深圳市科润达生物工程有限公司
*ELISA检测试剂盒产品规格
96T
*ELISA检测试剂盒预期用途
可的松检测试剂盒使用酶联免疫竞争法定量检测尿液中游离可的松。
可的松检测试剂盒检测原理
样本中的尿液可的松与辣根过氧化物酶标记的可的松竞争连结到包被板中的抗可的松抗体。温育后,经洗涤,连结的与游离的可的松分开。加入H2O2和TMB底物液,经一段时间后,生成了颜色,加入终止液终止酶促反应并检测吸光度。计算尿液中可的松需要一系列的标准品建立标准曲线。样本中尿液可的松浓度与颜色强度成正相关。
可的松检测试剂盒组成成分
标准品
S0 1×4ml
S1-S4 4×1ml
洗涤液 50ml
磷酸盐缓冲液0.2M 10倍浓缩
酶联物 33ml
HRP标记的可的松
微孔板 12×8
包被了抗可的松抗体
底物液 15ml
H2O2-TMB 0.26g/L(避免接触皮肤)
终止液 15ml
硫酸0.15mol/L(避免接触皮肤)
质控品(低) 1ml
即用型
质控品(高) 1ml
即用型
可的松检测试剂盒检测步骤
因需要进行双孔检测,每个标准品浓度(S0-S4)需要两个孔,空白对照为单孔。
试剂 | 标准品/质控品 | 样品 | 空白 |
标准品S0-S4 质控品 | 10 µL | ||
稀释的样本 | 10µL | ||
稀释的酶联物 | 300µL | 300µL | |
37℃温育1小时。 倒去孔中溶液,用350µL稀释好的洗液洗涤3次 | |||
TMB底物液 | 100µL | 100µL | 100µL |
室温(22-28℃)下温育15分钟,避光 | |||
终止液 | 100µL | 100µL | 100µL |
轻轻摇动微孔板,在450nm读出吸光度(以空白孔为参照) |
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