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如何研究遗传操控或药物暴露对 LCFAO过程的影响——安捷伦Seahorse XF棕榈酸酯氧化压力测试试剂盒

时间:2020-10-19      阅读:544

安捷伦Seahorse XF棕榈酸酯氧化压力测试通过评估细胞外的耗氧率(OCR)变化来测量长链脂肪酸氧化(FAO)。该试剂盒中包括XF棕榈酸酯-BSA FAO底物、左旋肉碱、乙莫克舍、寡霉素、FCCP和鱼藤酮/抗霉素A,用于确定在其他外源性底物缺乏或有限的情况下,细胞氧化棕榈酸酯的速率和能力。该试剂盒尤其适用于研究干预措施(遗传操控和药物暴露)对LCFAO过程的具体影响,并且可以作为Seahorse XF长链脂肪酸氧化压力测试的补充或后续分析。试剂盒随附可简化实验操作的标准化方案,以及可简化数据分析的云分析软件Seahorse Analytics

 安捷伦 Seahorse XF 棕榈酸酯氧化压力测试曲线

实验背景:

长链脂肪酸(LCFA)是线粒体代谢的主要底物。癌症、免疫学和干细胞生物学等领域的研究人员已证明了LCFA的氧化会对细胞命运、功能和适应性产生重大影响。其中许多发现不仅提供了全新的生物学见解,还揭示了新的干预途径以及促进治疗研究取得成功的新方法。Seahorse XF棕榈酸酯氧化压力测试试剂盒可以评估干预、遗传或药物暴露对活细胞中LCFAO过程的影响,获得相关的功能性数据。

实验原理:

此分析在棕榈酸酯(棕榈酸酯-BSA的形式)和左旋肉碱饱和的条件下进行,并且分析培养基中不存在与葡萄糖、丙酮酸和*相关的底物。在分析过程中加入乙莫克舍,然后依次加入寡霉素、FCCP 和鱼藤酮/抗霉素A。此实验设计提供关于基础呼吸、对乙莫克舍的急性响应,以及存在或不存在乙莫克舍时的大呼吸参数。虽然在基础条件下可以检测到较小的变化,即急性响应,但在高底物需求条件下(如FCCP)往往会出现更大的响应,从而显示出细胞氧化棕榈酸酯能力的差异。

实验优势:

- 研究干预措施(如遗传变异或药物暴露)对棕榈酸酯氧化的具体影响;

-了解如何通过操控或控制棕榈酸酯氧化活性来控制细胞表型、功能或适应性;

-可靠的功能信息,无需放射性标记;

-即用型试剂有助于在每次分析中获得一致的结果。

Seahorse XF棕榈酸酯氧化压力测试试剂盒与Seahorse XF长链脂肪酸氧化压力测试试剂盒区别:

Seahorse XF长链脂肪酸氧化压力测试是三种标准底物氧化压力测试之一。其旨在测试分析培养基中葡萄糖、丙酮酸和*底物饱和的条件下,细胞对内源性 LCFA的需求,尤其适合回答与LCFAO有关的底物需求和依赖性问题。

    高级棕榈酸酯氧化压力测试是在分析培养基中棕榈酸酯(棕榈酸酯-BSA的形式)和左旋肉碱饱和,而葡萄糖、丙酮酸和*底物供应有限的条件下进行。当实验设计要求细胞仅氧化长链脂肪酸(如棕榈酸酯)以研究干预措施对长链脂肪酸氧化过程的特异性影响时,本测试尤其适用。

使用安捷伦Seahorse XF棕榈酸酯-BSA FAO底物与安捷伦Seahorse XF细胞线粒体压力测试的动力学图。红色箭头表示对外源脂肪酸的利用。

各组间大呼吸的差异。数据取自上图中的速率测量点“10”

词汇表:

 

声明:仅供研究使用,不用于诊断性操作。

版权说明:版权归原作者及安捷伦细胞团队,本文内容部分来源于美国安捷伦科技公司()。如有问题请联系小编,欢迎批评指正,衷心感谢!

了解更多信息,请联系路易企业西南区业务:Agilent 技术热线: (手机)。

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