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线粒体是否“偏食”研究解决方案——安捷伦Seahorse XF底物氧化压力测试试剂盒

时间:2020-10-19      阅读:246

安捷伦Seahorse XF底物氧化压力测试试剂盒能够通过测量活细胞耗氧率(OCR)的变化快速评估细胞底物氧化利用情况。Seahorse XF底物氧化压力测试试剂盒可用于分析三种主要线粒体底物:长链脂肪酸、葡萄糖/丙酮酸和*。该测试有助于研究细胞如何通过改变或转变特定底物的氧化从而执行激活、增殖、分化等关键的细胞功能,并对遗传干预、药物干预或微环境生存做出响应。

 安捷伦 Seahorse XF底物氧化压力测试曲线

实验背景:

研究调控代谢的相关基因、蛋白质、通路,对于开发针对各种疾病的新靶标而言是一种非常有前景的方法。新证据表明,代谢物本身包括特定的线粒体底物氧化可以驱动细胞的功能和表型变化,涉及增殖、分化以及功能障碍和疾病。底物可用性是癌细胞增殖的驱动因素,底物不仅促进癌细胞的恶化和增殖,而且特定底物的可用性是肿瘤微环境影响*疗效的一个关键特征。癌症的治疗策略包括靶向多个代谢通路,糖酵解、TCA循环、电子传递链(ETC)和氧化磷酸化 (OXPHOS)以及丙酮酸、*和脂肪酸氧化。因此,了解底物的依赖性对于开发许多疾病的治疗方法是至关重要的。

线粒体底物氧化驱动细胞表型和功能/功能障碍的示例

实验原理:

安捷伦Seahorse XF底物氧化压力测试利用特定的底物氧化通路抑制剂并结合Seahorse XF细胞线粒体压力测试,可对线粒体利用的主要底物,如长链脂肪酸、葡萄糖/丙酮酸和*进行全面评估,包括在底物需求较少(即基础呼吸)和底物需求较多(即大呼吸)的条件下研究细胞更多地依赖哪种关键底物。

乙莫克舍((Etomoxir)通过抑制肉毒碱棕榈酰基转移酶1a (CPT1a)来抑制长链脂肪酸(LCFA)的氧化;UK5099通过抑制线粒体丙酮酸载体蛋白(MPC)来抑制葡萄糖和丙酮酸的氧化;BPTES通过抑制*酶1(GLS-1)来抑制*的氧化。

主要的代谢通路

实验优势:

使用Seahorse XF底物氧化压力测试试剂盒能够更方便地研究特定的底物氧化过程,以及它们在激活、增殖和分化等基本细胞功能中的重要作用。Seahorse XF底物氧化压力测试采用快速非破坏性的方法研究细胞如何氧化三种主要的线粒体底物:长链脂肪酸、葡萄糖/丙酮酸、*,从而揭示通路的特异性信息。该分析方法提供了直观的功能参数,这些参数建立在广受认可的 Seahorse XF 细胞线粒体压力测试基础上,无论是在基础条件下还是在响应升高的底物需求时,都非常适用于评估细胞的底物需求。利用标准化的分析方案、经验证的试剂和基于云的 Seahorse Analytics,可快速获得条理清晰的出色结果,大幅提升用户体验。

词汇表:

 

声明:仅供研究使用,不用于诊断性操作。

版权说明:版权归原作者及安捷伦细胞团队,本文内容部分来源于美国安捷伦科技公司()。如有问题请联系小编,欢迎批评指正,衷心感谢!

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