安捷伦Seahorse XF糖酵解速率测定是一种用于测量细胞糖酵解的准确可靠分析方法，通过测量和计算糖酵解及线粒体呼吸(CO₂)导致的酸化，从而对活细胞中的糖酵解活动速率进行定量分析。该试剂盒可以提供可靠、丰富及精确的糖酵解数据，适用于研究细胞疾病模型中的瞬时反应和代谢转换。

实验背景：

取决于能量需求和营养物质的供应，细胞可在糖酵解和线粒体呼吸之间轻松切换。糖酵解与大量正常生理过程（干细胞多能性、获得性免疫响应、肌肉功能、脑功能）以及一些病理生理过程（肿瘤形成）相关。因此，及时了解细胞的糖酵解程度，对于了解代谢活性和细胞功能之间的相互作用具有十分重要的意义。安捷伦Seahorse XF糖酵解速率测定试剂盒与Seahorse XF细胞能量代谢分析仪配套使用，该测定法可准确测量基础糖酵解速率和线粒体被抑制后的补偿性糖酵解速率。通过计算并减去线粒体/TCA循环来源的CO₂对细胞外酸化的贡献，所得到的糖酵解速率与乳酸累积数据具有直接的可比性。

实验原理：

在糖酵解途径中，葡萄糖分解为乳酸时质子被排到细胞外溶液中，这可通过XF分析仪检测到称为细胞外酸化速率(ECAR)。另外，线粒体有氧呼吸过程中产生CO₂，后者与水化合后使溶液酸化。在实验过程中，通过采用线粒体复合物I和复合物III抑制剂(Rot/AA)来抑制呼吸(OCR)，可计算呼吸来源的质子流出速率，并将其从总的质子流出速率中减去得到glycoPER。为了证实通路特异性加入糖酵解抑制剂2-DG，抑制糖酵解酸化。

实验优势：

安捷伦Seahorse XF糖酵解速率测定可通过计算和减去线粒体有氧呼吸来源(CO₂)的酸化进而准确测量细胞外质子流出，从而提供更可靠、更具体的糖酵解速率度量。XF糖酵解速率测定试剂盒可对活细胞中的糖酵解进行精确测定，揭示了乳酸终点测定法无法识别的瞬时反应和快速代谢转换。该方法能提供实时的细胞功能分析且成本低廉，明显优于乳酸终点分析法。

词汇表：

文献应用：

1、Progressive Upregulation of Oxidative Metabolism Facilitates Plasmablast Differentiation to a T-Independent Antigen

B Cells Progressively Upregulate OXPHOS after LPS Stimulation In Vivo

2、Mitochondria and oxidative stress in ovarian endometriosis

Mitochondrial respiration of ectopic (EC), eutopic (EU) and controlled (CE) stromal cells

3、The nuclear background influences the penetrance of the near-homoplasmic m.1630A > GMELAS variant in a symptomatic probａnd and asymptomatic mother  

Altered proton efflux rate in the proband's fibroblasts  

4、eIF4A supports an oncogenic translation program in pancreatic ductal adenocarcinoma

Inhibition of SLC25A10 lowers cellular metabolism particularly in anoxia-tolerant cancer cells

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