关于昆虫细胞培养的发展和关键点介绍
- 发布时间:2017/12/23 10:02:29
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随着生命科学的迅速发展,细胞工程愈来愈受到人们的重视。以昆虫细胞为对象的细胞培养技术在现代实验生物学上具有重要的价值,已经广泛地应用于医学、农业及生物学的各个领域。昆虫细胞是农业生物应用方面的*,主要是提取来自昆虫的一类真核细胞。通过培养制造宿主的病毒,这些病毒可以引起昆虫流行病,但对人畜和植物无害,因而可作病毒杀虫剂。还可以生产某些药用蛋白。
许多昆虫培养基配方正不断得到改进,以使之适于细胞生长。zui通用的商品培养基有Grace氏培养基、TC-100、IPL-41、TNM-FH以及经改良的哺乳动物细胞培养基TC199-MK等。
细胞培养的关键是培养基配方的开发,已有多种培养基用于支持昆虫细胞系的生长。昆虫细胞培养所用培养基一般均补加FBS,血清提供了细胞生长过程中所需的营养物质和微量元素,使细胞能健康生长和传代。但是FBS的使用也存在着缺点:价格高;每批血清的质量不同,影响细胞的生长和病毒复制;血清中的蛋白影响从培养的上清液中分离和提取重组蛋白,使蛋白的纯化更加困难;血清易被支原体污染。由于部分加入胎牛血清或牛血清使典型昆虫培养基变得很复杂。因此,无论工业上或学术上,开发无血清培养基都是必然的趋势。
由于在无血清培养基中含有从血清或动物脏器中纯化的蛋白成分,如胰岛素、转铁蛋白、白蛋白和脂蛋白等,增加了分离纯化的难度和成本。细胞在无血清低蛋白或无蛋白培养基环境中对剪切应力更为敏感,故需适当提高保护剂的浓度。无血清培养基的应用有时会降低重组蛋白的产量,在无血清培养基内,较高的细胞生长密度与相对较低水平的重组蛋白产量这一事实表明,促进细胞分裂的因子与促进重组蛋白生产的杆状病毒感染晚期起作用的因子是不尽相同的。无血清培养基配方还需进一步改进以便适应于重组蛋白的表达。