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人IL-10检测试剂盒（ELISA）
ELISA操作显色过程常见问题及解答
1） 显色剂配制后放置时间过长或使用过期显色剂；
2） 使用变质的显色剂。
1.未使用完毕的显色剂返回原瓶造成污染，显色反应不避光，或有阳光直射。
解决办法：
1） 显色剂尽量在临用前配制，坚持不用过期显色剂，肉眼可见浅蓝色的TMB显色剂不用；
2） A、B 液应避免接触金属器械。
1.使用量根据样本需要量取，取出后未使用完毕的显色液应弃去，不能再次返回原试剂瓶，以免造成显色液污染，影响下次使用；TMB对光敏感，一般显色反应要避光进行；
通用名称：人IL-10检测试剂盒（ELISA法）
英文名称：RayBio® Human IL-10 ELISA Kit
公司品牌：美国Raybio
储存条件：2-8℃
检测方法：ELISA方法
预期用途：仅用于科研，体外检测使用
参考价格：询价
产品货号：EIH-IL-10
产品规格：96T
检测样本：血清、血浆和细胞培养上清液
供应商家：深圳市科润达生物工程有限公司
IL-10elisa检测试剂盒产品规格
96T
IL-10elisa检测试剂盒预期用途
RayBio®人IL-10 ELISA试剂盒采用体外酶联免疫吸附测定法，定量测定人血清血浆和细胞培养上清液中的IL-10的含量。
人IL-10检测试剂盒简介
人IL-10由活化的CD8（+）外周血T细胞，抗原特异性和多克隆激活后的T辅助CD4（+）T细胞克隆，B细胞淋巴瘤和由细菌脂多糖和肥大细胞激活后的单核细胞产生。 IL-10是同型二聚体蛋白质，其亚基长度为160个氨基酸。 人IL-10与鼠IL-10显示73％的氨基酸同源性。 IL-10在T细胞的Th1T辅助细胞亚群中抑制许多细胞因子如IL-2和TNF-β的合成，但不抑制Th2T辅助细胞的合成。 IL-10还在辅助细胞存在下抑制有丝分裂原或抗CD3诱导的T细胞增殖，并减少IFN-γ和IL-2的产生。
人IL-10检测试剂盒检测原理
人IL-10检测试剂盒使用包被有人IL-10特异性抗体的96孔酶标板，标准品和样品被加入到孔中，样品中存在的IL-10通过固相的抗体与孔结合。洗涤后加入*化的抗人IL-10抗体。 洗去未结合的*化抗体后，将HRP-标记的*加入到到孔中。 再次洗涤板孔，向孔中加入TMB底物溶液，底物显色与所结合的IL-10量成比例。 加入终止液颜色从蓝色变为黄色，并且在450nm处测量颜色的吸光度值。
人IL-10检测试剂盒存储
人IL-10检测试剂盒可在-20°C下保存，从装运之日起存放可长达1年。 避免反复冻融循环。 试剂盒可以在4℃下储存长达6个月。 对于更长时间储存时，建议储存在-80°C。 该试剂盒组分见下表
人IL-10检测试剂盒组成成分
| 组分 | 表述 | 储存/预准备后稳定性 |
| IL-10酶标板（项目A） | 12*8=96孔，包被有抗人IL-10抗体 | 4℃ 1个月 |
| 浓缩洗涤液（20x）（项目B） | 20x浓缩溶液 25ml | 4℃ 1个月 |
| 标准蛋白（项目C） | 2瓶人类IL-10。1个小瓶就够配制每个一式两份的标准品。 | -80℃1周 |
| 检测抗体IL-10（项目F） | 2瓶*化的抗人IL-10。 每个小瓶足以测定微板的一半。 | 4℃ 5天 |
| 浓缩HRP-链霉亲和素（项目G） | 200μl 200X浓缩HRP缀合链霉亲和素 | 不能保存和重新使用 |
| 一步法TMB底物（项目H） | TMB溶液12ml | N/A |
| 终止液（项目I） | 8ml 0.2M硫酸 | N/A |
| 测定稀释剂A（项目D） | 30ml稀释缓冲液， | N/A |
| 测定稀释剂B（项目E） | 15ml 5X浓缩液 | 4℃ 1个月 |
| 将未使用的板条重新装回到含有干燥剂包的袋中，沿着整个边缘重新密封。 | ||
人IL-10检测试剂盒检测步骤
1.使用前将所有试剂和样品置于室温（18 - 25ºC）。建议所有标准和样品至少重复一次。
2.根据您的实验标记可拆卸的8孔条。
3.分别加入样品和每个标准品100μl（参见试剂制备步骤3）到适当的板孔中。盖上盖子，室温温和振荡孵育2.5小时
4.弃去溶液，用1X洗涤液洗涤4次。使用多通道移液器或自动洗板机洗板，每孔加入洗涤缓冲液（300μl）。每个步骤中去除液体对于良好的性能是至关重要的。洗完后，通过吸取或倾析清除任何剩余的洗涤缓冲液。倒置板并用干净的吸水纸吸干印迹。
5.每孔加入100μl1X制备的*化抗体（试剂制备步骤6）。在室温下温和振荡孵育1小时。
6.弃去溶液。重复洗涤，如步骤4。
7.加入100μl制备的链霉亲和素溶液（见试剂制备步骤7）。在室温下温和摇动孵育45分钟。
8. 弃去溶液。 重复洗涤，如步骤4。
9.向每个孔中加入100μlTMB一步底物试剂（项目H）。在室温下在黑暗中轻轻振荡孵育30分钟。
10.向每个孔中加入50μl终止液（项目I）。 立即读取450 nm处吸光度值。
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