李斯特菌鉴定试剂盒

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李斯特菌鉴定试剂盒

概况：

该试剂盒为标准化的显色检测系统，通过李斯特菌特异性的动力学、糖发酵和生化反应进行鉴定。微生物的发酵反应，引起培养基颜色发生变化。

用途：

鉴定李斯特菌

使用说明：

• 待鉴定菌种应*行分离和纯化。可在PALCAM琼脂（M1064）或胰蛋白䏡琼脂（M538）（含血或不含血）上挑取一个菌落，接种在５ml脑心浸膏肉汤（M210）中，在35-37℃培养4-6小时，直到在620nm处，接种液浊度≥1.0OD。

• 无菌打开试剂盒，撕掉封条。每孔接种50μl上述菌液。也可用接种环划线。在35℃-37℃孵育24-48小时。

结果判定：

依据结果诠释表。在第2孔、第4孔和第5孔，在24-48小时孵育期结束后，分别添加如下试剂：

1）触酶试验：第1孔

• 用接种环刮取第1孔内表面，将接种环蘸到含3%H2O2的干净小试管中。

• 接种环表面冒泡为阳性。

• 接种环表面没有冒泡为阴性。

注意：3%的H2O2需新鲜配置。

2）硝酸盐还原试验：第2孔

• 加1-2滴对氨基苯磺酸（R015）和1-2滴N,N-二甲基-1-萘胺（R009）

• 立即出现粉红色为阳性

• 颜色无变化为阴性

3）七叶苷水解试验：第3孔

• 第3孔变为黑色，为阳性反应。

4）伏-普试验：第4孔

• 加3-4滴Barritt试剂A(R029)和1-2滴Barritt试剂B（R030）

• 10分钟内出现粉红色为阳性

• 无颜色变化或有轻微变化为阴性。

5）甲基红试验：第5孔

• 加1-2滴甲基红试剂（I007）

• 试剂保持红色为阳性

• 试剂脱色变黄为阴性

6）糖发酵试验：第6孔-第12孔

• 酸产生导致培养基颜色由红变黄，为阳性反应。

• 如果仍保持红色，则为阴性。

12种生化反应：