简述薄层色谱法的操作方法
- 发布时间:2019/5/28 11:16:38
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【仪器网 使用手册】薄层色谱法是指根据各成分对同一吸附剂的吸附能力不同,在流动相流动固定相的过程中,连续发生吸附、解吸、再吸附、再解吸,实现各成分的相互分离的吸附薄层色谱法分离法。 以下,根据网上的资料,整理在薄层色谱法的使用中可以做的步骤
1.制定薄层板,将固定相和水用研钵向一个方向研磨混合,除去表面气泡后,放入涂布器,将涂布器顺畅地移动到玻璃板上进行涂布,取下涂布在薄层上的玻璃板,放置在水平台上在室温下干燥后,在规定的温度下干燥,放入干燥剂进行干燥 使用前检查均匀度。
2.点样除另有规定外,点基线距底边规定距离,点直径和点间距与纸色谱法相同,点间距看点扩散情况,不影响检测 做样品的时候,注意不要损伤薄层表面。
3.展开油缸时,事先用展开剂使之饱和。 在汽缸中加入足够量的展开剂,将与汽缸相同高度、宽度的滤纸贴在墙壁上,一端浸在展开剂中,密封汽缸顶部的盖子,使系统平衡,或按照本文的规定操作。将样品薄片放入展开缸的展开剂中,浸渍在展开剂中的深度从薄片的底边开始 (请勿将样品点浸入展开剂),密封盖板,展开至规定距离取出薄板晾干,按照各品种以下的规定进行检查。
4.用薄层扫描仪扫描检测色谱斑点,或直接扫描色谱斑点到薄层上定量上可以利用薄层扫描法。薄层扫描的方法除另有规定外,还依据各种薄层扫描仪的结构特征和使用说明根据具体情况,选择吸收法或荧光法,以二波长或一波长进行扫描。 对薄层扫描的结果产生影响原因很多,在保证供试品的斑点在一定浓度范围内形成线形的基础上,与供试品对照品在同一薄层展开扫描,比较定量,减少误差。 有各种各样的供试品只有得到分离度和再现性好的薄层色谱,才能得到满意的结果。
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