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清洁、消毒、灭菌是预防和控制医院感染的一个重要环节。消毒、灭菌的方法：
　　（一）物理消毒灭菌法，利用物理因子杀灭微生物的方法。包括热力消毒灭菌、辐射消毒、空气净化、超声波消毒和微波消毒等。
1． 热力消毒灭菌 高温能使微生物的蛋白质和酶变性或凝固（结构改变导致功能丧失），新陈代谢受到障碍而死亡，从而达到消毒与灭菌的目的。在消毒中，热可分为湿热与干热两大类。
　　[干热消毒灭菌]  干热是指相对湿度在20％以下的高热。是由空气导热，传热效果较慢。
　　（1）燃烧法是一种简单、迅速、*的灭菌方法，因对物品的破坏性大，故应用范围有限。
　　（2）干烤法，分为1、电热烤箱：利用烤箱的热空气消毒灭菌。烤箱通电加热后的空气在一定空间不断对流，产生均一效应的热空气直接穿透物体。热空气消毒灭菌法适用于玻璃器皿、瓷器以及明胶海棉、液体石腊、各种粉剂、软膏等。灭菌后待箱内温度降至50－40℃以下才能开启柜门，以防炸裂。2、　微波消毒：微波是一种高频电磁波，其杀菌的作用原理，一为热效应，所及之处产生分子内部剧烈运动，使物体里外湿度迅速升高；一为综合效应，诸如化学效应、电磁共振效应和场致力效应。目前已广泛应用于食品、药品的消毒，用微波灭菌手术器械包、微生物实验室用品等亦有报告。　　微波对人体有一定危害性，其热效应可损伤睾丸、眼睛晶状体等，长时间照射还可致神经功能紊乱。使用时可设置不透微波的金属屏障或戴特制防护眼境等。
　　[湿热消毒灭菌]　是由空气和水蒸气导热，传热快，穿透力强，湿热灭菌法比干热灭菌法所需温度低、时间短。分为：（1）煮沸法 将水煮沸至100℃，保持5－10分钟可杀灭繁殖体，保持1－3小时可杀灭芽胞。此法适用于不怕潮湿耐高温的搪瓷、金属、玻璃、橡胶类物品。　　经煮沸灭菌的物品。“无菌”有效期不超过6小时。　　（2）高压蒸汽灭菌法高压蒸汽灭菌器装置严密，输入蒸汽不外逸，温度随蒸汽压力增高而升高，当压力增至103－206kPa时，湿度可达121.3-132℃。高压蒸汽灭菌法就是利用高压和高热释放的潜热进行灭菌，为目前可靠而有效的灭菌方法。适用于耐高温、高压，不怕潮湿的物品，如敷料、手术器械、药品、细菌培养基等。使用如下器械：
手提式高压蒸汽灭菌器：为金属圆筒，分为二层，隔层内盛水，有盖，可以旋紧，加热后产生蒸汽。锅外有压力表，当蒸汽压力升高时，温度也随之相应升高。该灭菌器体积小，可自发蒸汽，便于携带。　　操作方法如下：在灭菌器中盛水3000ml；将拟灭菌的物品随同盛装的桶放入灭菌器内；将盖子上的排气软管插于铝桶内壁的的方管中；盖好盖子，拧紧元宝螺丝，勿使漏气；锅下加热，打开排气活门，放出冷空气（一般在水沸后排气10－15分钟左右），关闭放气活门，使压力逐渐上升至103kPa，温度达121.3℃,维持20分钟后，排气至“0”时，慢慢打开盖子。如果突然开盖，冷空气大量进入，蒸汽凝成水滴，使物品潮湿，且玻璃类易发生爆裂。
　　卧式高压蒸汽灭菌器；其结构原理同手提式高压蒸汽灭菌器，因其体积大，一次可灭菌大量物品。
　　预真空式高压蒸汽灭菌器；在通入蒸汽前有一预处理阶段，即柜室内抽负压至2.6kPa（空气排除约98％），　预真空式高压蒸汽灭菌器湿度可达132－135℃，具有灭菌周期快、效率高，节省人力、时间和能源；但设备费、维修费较高，对柜体密封性要求较高。
　　2．辐射消毒灭菌 包括光照消毒和电离辐射。光消毒主要是利用紫外线照射，使菌体蛋白发生光解、变性，菌体内的氨基酸、核酸、酶遭到破坏而致细菌死亡。紫外线通过空气时，可使空气中的氧气电离产生臭氧，加强了杀菌作用。紫外线穿透性差，不能透过玻璃，尘埃，纸张和固体物质；透过空气能力较强，透过液体能力很弱。光照消毒对杆菌杀菌力强，对球菌较弱，对霉菌、酵母菌更弱。对生长期细菌敏感，对芽胞敏感性差。光照消毒因地区、季节、环境的影响，效果有所差异，当温度低于4℃，湿度超过50％时，杀菌能力减弱。因此，消毒时，必须提高温度，延长消毒时间，一般室温保持在10－25℃为宜。减少空气中的尘埃，直接照射物品，可提高消毒的效果。具体采用：　　
   （1）紫外线灯管消毒法 紫外线因其光谱位于紫色可见光之外，故称紫外线。紫外线灯管是一种人工制造的低压汞石英灯管，管内注入压强0.4～0.6kPa的氩气和水银数滴，管子两端用钨丝作成螺旋状电极。通电后，氩气先电离，然后冲击水银电离，发放紫外线。经5－7分钟后受紫外线照射的空气，才能使氧气产生臭氧。因此消毒时间应从灯亮5－7分钟后计时，紫外线杀菌能力与其波长有密切关系。*杀菌波长为2537nm（是细菌对紫外线吸收zui快的波长）。　　常用的紫外线灯管有15W、20W、30W、40W四种，可采用悬吊式，移动式灯架照射，或紫外线消毒箱内照射。紫外线灯配用抛光铝板作反向罩，可增强消毒效果。用于物品消毒时，如选用30W紫外线灯管，有效照射距离为25－60cm，时间为25－30分钟（物品要摊开或挂起，扩大照射面）。　　用空气消毒时，室内每10m2 安装30W紫外线灯管1支，有效距离不超过2m。照射时间为30－60分钟，照射前清扫尘埃，照射时关闭门窗，停止人员走动。
    （2）臭氧灭菌灯（电子灭菌灯）消毒法 灭菌灯内装有1-4支臭氧发生管，在电场作用下，将空气中的氧气转换成高纯臭氧。臭氧主要依靠其强大的氧化作用而杀菌。使用灭菌灯时，关闭门窗，确保消毒效果。用于空气消毒时，人员须离开现场，消毒结束后20-30分钟方可进入。
   （3）电离辐射灭菌法 应用放射性同位素r源或直线加速器发生的高能量电子束进行灭菌。适用于忌热物品的常温灭菌方法。又称“冷灭菌”。尤其对一次性应用的医疗器材、密封包装后需长期储存的器材、精密医疗器材和仪器，以及移植和埋植的组织和人工器官，节育用品等特别适用。
　　3．空气净化空气本身缺乏细菌维持生活所需的营养物，再加上日光对细菌的影响，故空气中细菌很少。但如果室内光照和通风较差，同时微生物不断地从室内人群的呼吸道、皮肤排出，以及室内物品表面的浮游菌。使室内空气中细菌比室外多。利用通风或空气过滤器可使室内空气中的细菌、尘埃大降低，达到净化目的。空气过滤除菌是医院空气净化措施中采取的现代化设备。即使空气通过孔隙小于0.2μ的过滤器，利用物理阻留、静电吸附等原理除去介质中的微生物。通过过滤除菌使病室、手术室或无菌药物控制室内的空气达到净化的目的。
　　4．超声波消毒法 是利用频率在20－200kHz的声波作用下，使细菌细胞机械破裂和原生质迅速游离，达到消毒目的。如超声洗手器，用于手的消毒。超声洗涤机，用于注射器的清洁和初步的消毒处理。
　　（二）化学消毒灭菌法
　　利用化学药物渗透细菌的体内，使菌体蛋白凝固变性，干忧细菌酶的活性，抑制细菌代谢和生长或损害细胞膜的结构，改变其渗透性，破坏其生理功能等，从而起到消毒灭菌作用。所用的药物称化学消毒剂。有的药物杀灭微生物的能力较强，可以达到灭菌，又称为灭菌剂。　　凡不适于物理消毒灭菌而耐潮湿的物品，如锐利的金属、刀、剪、缝针和光学仪器（*、*等）及皮肤、粘膜，病人的分泌物、排泄物、病室空气等均可采用此法。
　　2．常用化学消毒灭菌方法
　　（1）浸泡法 选用杀菌谱广、腐蚀性弱、水溶性消毒剂，将物品浸没于消毒剂内，在标准的浓度和时间内，达到消毒灭菌目的。　　
   （2）擦拭法 选用易溶于水、穿透性强的消毒剂，擦拭物品表面，在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的。　　
   （3）薰蒸法 加热或加入氧化剂，使消毒剂呈气体，在标准的浓度和时间里达到消毒灭菌目的。　　适用于室内物品及空气消毒或精密贵重仪器和不能蒸、煮、浸泡的物品（*、*以及传染病人用过的票证等），均可用此法消毒。　　此外，尚可应用甲醛或过氧乙酸等进行熏蒸灭菌　　
   （4）喷雾法借助普通喷雾器或气溶胶喷雾器，使消毒剂产生微粒气雾弥散在空间，进行空气和物品表面的消毒。　　
   （5）环氧乙烷气体密闭消毒法将环氧乙烷气体置于密闭容器内，在标准的浓度、湿度和时间内达到消毒灭菌目的。　　环氧乙烷是广谱气体杀菌剂，能杀灭细菌繁殖体及芽胞，以及真菌和病毒等。穿透力强，对大多数物品无损害，消毒后可迅速挥发，特别适用于不耐高热和温热的物品，如精密器械、电子仪器、光学仪器、心肺机、起博器、书籍文件等，均无损害和腐蚀等副作用。本品沸点为10.8℃,只能灌装于耐压金属罐或特制安瓿中。