信帆现货供应:甘油含量检测试剂盒!
- 发布时间:2022/3/4 17:21:52
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信帆现货供应:甘油含量检测试剂盒!
产品说明:
甘油是甘油三酯的水解产物。脂蛋白酯酶能水解血液中的甘油三酯;胰脂酶可以水解食 物 中的甘油三酯;激素敏感脂肪分解酶能水解脂肪细胞中的甘油三酯。与游离脂肪酸一样,甘油含量是甘油三酯水解反应的可靠检测指标,但检测更方便。本试剂盒采用甘油磷酸氧化酶法和经典GPO-Trinder 酶学反应相结合的方法,通过比色法测定液体样本中的甘油含量。经过优化后,操作步骤更加简单,检测线性范围在10-1200µmol/L,可靠性和重复性俱佳,适合生物医学、食品实验室检测‘
检测原理:
在ATP存在下甘油被甘油激酶磷酸化为3-磷酸甘油,再被甘油磷酸氧化酶氧化产生过氧化氢;在过氧化物酶作用下生色底物转化为苯醌亚胺,其光密度值与甘油浓度成正比。
适用范围:测定血液、细胞培养基、体液、酒类饮料中的甘油浓度。
所需设备:
酶标仪、生化分析仪或721、722型可见光分光光度计。最加工作波长550nm,如 无此波长建议优先选用570nm、次选530、490nm。
操作步骤:
一. 样本处理:酒类、饮品、清澈液体样本:可直接进行测定,如超过线性范围可用蒸馏水或生理盐水稀释后再测定。
培养液:取不含酚红、无颜色、无血清的细胞培养基,如有细胞碎片应4ºC,,12,000g离心5min, 取上清进行测定。
血液:新鲜抗凝血,4ºC,2,000g 离心 5min 得到血浆;非抗凝血,先 4ºC 静置 2h 得到血清后, 2000g离心10min,除去血细胞。将得到的血浆/血清70ºC 加热10分钟灭活內源脂肪酶,12,000g 离 心 10min ,取上清测定或-20ºC 保存。
二 .工作溶液配制:按4:1比例,取4 ml试剂R1与 1 ml 试剂 R2 混合,立即使用或 4ºC 保存 <1天,变色弃去。
三 .标准品稀释:用蒸馏水、生理盐水或与样品缓冲液一致的液体,将4mM甘油标准品倍比稀 释为 1000、500、250、125、62.5、31.25、15.625、7.8125 µmol/L,通常取其中 4~6 管即可, 注意设置 0 浓度对照反应管。