PC0030 Lowry法蛋白浓度测定试剂盒-1000微孔
产品简介
英文名称：Lowry Protein Assay Kit
规格：100T(1000微孔)
储存条件：BSA附件-20℃，其它试剂RT，有效期1年
单位：盒
详细信息
Lowry法蛋白浓度测定试剂盒-1000微孔
Lowry法蛋白浓度测定试剂盒-1000微孔
Lowry法包括两步反应：第一步是在碱性条件下，蛋白质与铜作用生成蛋白质-铜络合物；第二步是此络合物将Folin试剂还原，产生深蓝色，颜色深浅与蛋白质含量成正比。定量范围为5～500μg/ml蛋白质。Folin试剂显色反应由酪丨氨酸、色丨氨酸和半胱丨氨酸引起，因此样品中若含有酚类、柠檬酸和巯基化合物均有干扰作用。此外，不同蛋白质因酪丨氨酸、色丨氨酸含量不同而使显色强度稍有不同。
Lowry法测定较为不受脂类物质干扰，适于脂类含量较高的样品测定。也能耐受相当浓度的去垢剂如SDS。
操作说明：
根据需要量，取适量 Folin 酚甲试剂 A 和 B 按 50:1 混合，混合后有效期为 24 小时，过期失效。
根据需要量，取适量 BSA 标准品用 PBS 稀释稀释 10 倍至浓度 0.5mg/ml。若采用酶标仪法(96 孔)
将标准品按 0, 2, 4, 6, 8, 12, 16, 20ul 加到 96 孔板中，加 PBS 补足到 20ul。
将样品作适当稀释(最好多做几个梯度)，加 20ul 到 96 孔板的样品孔中。由于移液器在取小量时的误差，标准线前面的点误差比较大，所以尽可能的让样品点落在标准线 1/2 后。
将配好的 Folin 酚甲试剂每孔加入 200ul，轻轻震动，混匀，室温放置 10 分钟。
各孔加入 20 微升 Folin 酚乙试剂，迅速混匀，37℃放置 30 分钟。用酶标仪测定 A650 计算蛋白浓度。
若采用分光光度计法（接上述步骤 2）
3.取八支（或者更多）5ml 离心管，标号，按下表加入试剂。
4.混匀，37℃放置 30 分钟。分光光度计测定 A650 计算蛋白浓度