BC0025 丙二醛(MDA)含量检测试剂盒
产品简介
储存条件:2-8℃
有效期:6个月
单位:盒
英文名称:Malondialdehyde(MDA) Content Assay Kit
别名:丙二醛试剂盒 MDA Kit 丙二醛(MDA)试剂盒 丙二醛(MDA)试剂盒
检测方法:微量法 Spectrophotometer/Microplate Reader
详细信息
详见说明书
丙二醛(MDA)含量检测试剂盒产品说明:
氧自由基作用于脂质的不饱和脂肪酸,生成过氧化脂质;后者逐渐分解为一系列复杂的化合物,其中包括丙二醛(MDA)。通过检测 MDA 的水平即可检测脂质氧化的水平。丙二醛(MDA)在酸性和高温条件下,可以与硫代*比妥酸(thiobarbituric acid,TBA)缩合,生成棕红色的三甲川,其最大吸收波长在 532nm。进行比色后可估测样本中 MDA 的含量。
注意:实验之前建议选择 2-3 个预期差异大的样本做预实验。
需自备的仪器和用品:
可见分光光度计/酶标仪、水浴锅/金属浴、台式离心机、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96 孔板、研钵/匀浆器/细胞超声破碎仪、冰和蒸馏水。
丙二醛(MDA)含量检测试剂盒注意事项:
若发现检测样本吸光值过低,可以将沸水浴时间 60min 调整为 90min 或者更长,但同一实验中的 MDA 的检测都需要延长到同一时间以免引起误差。
样本处理(可适当调整待测样本量,具体比例可以参考文献)
1、 细菌或细胞样本的制备:收集细菌或细胞到离心管内,离心后弃上清;按照每 500 万细菌或细胞加入 1mL 提取液,超声波破碎细菌或细胞(功率 200W,超声 3s,间隔 10s,重复 30 次);8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
2、 组织样本的制备:称取约 0.1g 组织,加入 1mL 提取液进行冰浴匀浆;8000g 4℃离心 10min,取上清,置冰上待测。
3、 低、中脂血血清(浆)等液体样本:直接检测。
4、 高脂血或者油脂类样本:取 40μL 样本和 80μL 无水乙醇混合(即样本被稀释 3 倍),涡旋震荡 5min 后使用。不同高脂肪类样本可能会有不同的稀释倍数,可以稀释不同倍数进行预实验以确定最佳稀释倍数。同时操作表中空白管的蒸馏水应以(33μL 蒸馏水+67μL 乙醇)代替。