凡购买本司任何一种酶联免疫检测试剂盒，您只需将需要检测的动物（Human,Rat,Mouse,Rabbit,Pig,Monkey……）种类和检测指标（介素类、因子类）及标本数量（48T/96T）告知我司业务人（张）员即可。在接到客户标本当日起，两周内将检测报告交到客户手中。

北京冬歌生物科技有限公司提供的检测用所有试剂，适合检测包括血清、血浆、尿液、胸腹水、灌洗液、脑脊液、细胞培养上清、组织匀浆等标本，灵敏度*，多年专业酶免服务，我们保证对所售任何产品一概负责到底，每一份实验结果都真实可靠。

在收集标本前都必须有一个完整的计划，必须清楚要检测的成份是否足够稳定。我们提倡新鲜标本尽早检测，对收集后当天就进行检测的标本，及时储存在4℃备用，如有特殊原因需要周期收集标本，请造模取材后，将标本及时分装后放在-20℃或-70℃条件下保存。因冰室与室温存在一定温差，蛋白极易降解，直接影响实验质量，所以避免反复冻融。代测放免标本的客户取材前须向我司销售人员索要说明书，具体操作注意事项请与我司技术人员沟通。

包括血清、血浆、尿液、胸腹水、脑脊液、细胞培养上清等。

1、血清：

室温血液自然凝固10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

2、血浆：

应根据标本的要求选择EDTA、柠檬酸钠或肝素作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

3、尿液：

用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照此实行。

4、细胞培养上清：

检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。保存过程中如有沉淀形成，应再次离心。

5、组织标本：

切割标本后，称取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷冻保存备用。标本融化后仍然保持2-8℃的温度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或匀浆器将标本匀浆充分。离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清。分装后一份待检测，其余冷冻备用。

1、 包被抗原：稀释液pH 9.6 碳酸盐缓冲液，多肽浓度2ug/ml，0.1ml/孔，4oC，洗净

2、 1%BSA (pH 9.6 碳酸盐缓冲液) 封闭，0.1ml/孔，37oC1h，洗净

3、 稀释抗血清(可稀释不同浓度) 0.1ml/孔，37oC 30分钟，洗净

4、 稀释辣根过氧化物每标记的二抗 0.1ml/孔，37oC 40分钟，洗净

5、 显色：TMB显色

A液：四甲基联苯胺10mg 溶于DMF1ml中，再用pH5.0柠檬酸缓冲液稀释100倍

B液：5ul双氧水加蒸馏水12.5ml

终止液：2N硫酸

A液、B液各一滴，比光显色10分钟，终止液一滴

6、 450nm 波长 测OD值