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色谱柱的保养

时间:2016-12-20      阅读:8

  在正常情况下,色谱柱至少可以使用3—6个月,能完成数百次以上的分离。但是,若操作不慎,将使色谱柱很易损坏而不能使用。因此为了保持柱效、柱容量及渗透性,必须对色谱柱进行仔细地保养。  


  1.色谱柱极易被微小的颗粒杂质培塞,使操作压力速升高而无法使用,因此必须将流动相仔细地蒸馏或用0.45μm孔径的滤膜过滤。在流动相组贮槽与色谱柱间,安装0.45μm孔径的过滤器。在柱子上端接头处装上多孔过滤片,以防止固体颗粒进入色谱柱中。在水溶液流动相中,细菌容易生长,可能堵塞筛板加入0.01%NoHa能防止能防止细菌生长。


  2.使用进祥阀进样,以防止注射器进样时、注射隔膜碎屑堵塞柱子入口。 


  3.对硅胶基键合相填科,水溶液流动相的PH值不得超出2—8.5的范围,使温度不宜过高。柱子在酸性或碱性条件下使用之后,。应依次用水、甲醇清洗,对暂时不用而需要较长时间保存的柱子,要用纯甲清洗,柱子两端用金属螺帽封闭,保存于干净的有机溶剂中。


  4.要防止色谱柱被振动或撞击,否则柱内填料床层产生裂缝和空隙,会使色谱峰出现“驼峰”或“对峰”。  


  5.要防止流动相逆向流动,否则将使固定相层位移,柱效下降。  


  6.使用保护柱。连续注射含有未被洗脱样品时,会使柱效下降,保留值改变。为了延长柱寿命,在进样阀和分析柱间加上保护柱,其长度一般为3—5cm,填充与分析柱性质相似的表面多孔型固定相,因此可干法填装。而且价廉、更换容易。实验表明,使用保护柱后,除了使扩为零的组分的塔板数减少外,其柱效下降很少。

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