③ 用另一支*从1号瓶内抽取0.5 ml经充分振摇后的水样注入2号瓶内稀释，充分振摇，待用；

       ④ 再用一支*从2号瓶中内抽取0.5ml经充分振摇后的水样注入3号瓶内稀释，充分振摇，待用；

⑤ 依次类推稀释直到zui后一瓶为止，待用。

       ⑥ 将上述所有稀释过的测试瓶放入恒温培养箱中培养，按表１进行细菌生长的鉴别。

表１　　细 菌 生 长 的 鉴 别 方 法

四、细菌量计量：

１．在一定温度下培养一定时间后，按瓶号列出稀释梯度，并根据细菌瓶阳性反应的个数，确定生长指标和级数（参见附录及示例）．

２．根据生长指标查表２或表３，确定细菌量基数并乘以级数，即为细菌量总数。

　　　　　　　　细菌量总数＝细菌量基数×级数

二组平行样重复试验查表２

　　三组平行样重复试验查表３

3、细菌量总数结果报告示例见表４

五、注意事项

1、测试瓶中若有白色沉淀为过量营养成份，属正常现象，不影响测试。

2、常温条件下，测试瓶储存有效期为一年。

3、测试瓶经稀释后，一定要用力振摇1~2分钟，以保证测试结果的准确性。 

表２  二 次 重 复 细 菌 量 基 数 表

表３    三 次 重 复 细 菌 量 基 数 表

表４  细 菌 量 总 数 结 果 报 告 示 例 表

附录

一、        生长指标的确定原则．

１．全部呈阳性反应的zui后一列平行样应为生长指标的*位数．

２．同一平行样，有Ｘ个阳性反应瓶，生长指标即为Ｘ． 

二、级数的确定原则

１．全部呈阳性反应的zui后一列平行样的瓶号数减去１，即为级数ｎ，以１０^ｎ表示．

　２．１号瓶的２或３个平行样未全部发生阳性反应时，级数为０，即为１０^０ 

 示例１

①   ②   ③   ④   ⑤

+     -    -    -    -

+     +    -    -    -

+     +    +    -    -

生长指标：　３　　２　１

级　　数：　１０^０（①－１＝０）

　示例２

            ①   ②   ③   ④   ⑤

            +    +     +    -    -

            +    +     +    -    -

            +    +     +    +    +

生长指标：　　　　　３　　１　１

　级　　数：　１０^２　（③－１＝２）

示例３　

　　　　　　①　　②　　③　　④　　⑤

　　　　　　+　　　+　　-　　　+　　-

　　　　　　+　　　+　　+　　　-　　-

生长指标：　　　　２　　１　　１

级　　数：　１０^１　（②－１＝１）

示例４　

　　　　　①  ②  ③  ④  ⑤

　　　　　-   +   -   -   -

　　　　　+　 -　 +　 -　 -

生长指标：１　 １　１

级　　数：　１０^０　

细菌测试瓶测试方法及结果报告示例

例、做三个平行样重复试验，每个样稀释5个梯度：

      ①    ②    ③    ④    ⑤

①^／   ②^／   ③^／   ④^／   ⑤^／

①＂  ②＂  ③＂  ④＂  ⑤＂

即分别在① ①^／①＂号瓶中注入0.5ml水样，摇匀后取出0.5ml再分别注入② ②^／②＂号瓶中；摇匀后取出0.5ml再分别注入到③ ③^／③＂号瓶中，依次类推，直至⑤ ⑤^／⑤＂号瓶。

在恒温下放置一定时间后（大肠菌群37℃，24小时）观察测试瓶阳性（变色）反应个数。

例1、（打√者为阳性反应---以+表示）    

      ①_√    ②      ③     ④    ⑤           

①^／_√   ②^／_√   ③^／_√  ④^／   ⑤^／      

①＂_√  ②＂_√  ③＂  ④＂  ⑤＂  

即

则此生长指标为321，级数为0。查三次重复计数表。321对应的细菌量为15个/ml。此系列报告结果为：15×10⁰=15个/ml。

例2、 

①_√    ②_√       ③_√   ④    ⑤         

①^／_√   ②^／_√   ③^／_√  ④^／   ⑤^／ 

①＂_√  ②＂_√  ③＂  ④＂_√ ⑤＂       

即  

则此生长指标为321，级数为1。查三次重复计数表。321对应的细菌量为15个/ml。此系列报告结果为：15×10¹=150个/ml。

例3、

①     ②_√        ③     ④    ⑤        

①^／_√   ②^／_√  ③^／_√   ④^／   ⑤^／         

①＂   ②＂   ③＂    ④＂  ⑤＂      

  即 

则此生长指标为121，级数<0。查三次重复计数表。121对应的细菌量为1.5个/ml。此系列报告结果为：≤1.5×10⁰既≤1.5个/ml。

例4、  ①_√     ②_√         ③_√   ④_√   ⑤_√                 

①^／_√    ②^／_√   ③^／_√  ④^／_√  ⑤^／_√  即          

①＂_√   ②＂_√   ③＂_√ ④＂   ⑤＂     

例4中的生长指标第1位数3对应③ ③^／③＂号瓶

   依次类推。

④ 如果*列（① ①^／①＂号瓶）未全部发生阳性反应，报告结果应注明“≤”，如例3；如果至zui后一列（⑤ ⑤^／⑤＂号瓶）全部发生阳性反应，报告结果应注明“≥”，（如例5）。此情况下说明细菌量大，应增加测试瓶的个数，以求得较准确的结果。

⑤ 测试瓶注入水样（稀释）后应用力振摇，以保证结果的准确性；逐级稀释水样时，应更换*，以保证结果的准确性。

        北京华运安特科技有限责任公司

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