苏州市莱顿科学仪器有限公司

：        ：

液相色谱法—检测黄曲霉毒素残留

1.原理

样品经有机溶剂提取、净化和衍生化反应后，浓缩液注人HPLC仪，经色谱柱分离，分离出的组分依次进人荧光检测器（发射波长360 nm、激发波长245 nm），产生相应的电信号，由记录仪记录响应信号，经微处理机自动计算及打印出样品中AFT含量（ng）。
2.仪器
    HPI.C仪（具荧光检测器）。
3.试剂
    ①硅镁型吸附剂：100-1200目，350℃烘2 h，冷后装入密闭容器中，用前加水15％减活，平衡48h。可谇续傅用7天。
    ②流动相：甲醇+0.01mol·L-1 KH2P04（1+1）溶液配制后，经0.45 um滤膜抽滤并脱气。
    ③层析柱，底层和上层为2.cIn厚的无水Na2S04，中层为0.4 g硅镁吸附剂，均以氯仿湿润。
    ④其他试剂参照薄层层析法。
4.仪器工作条件
    ①具荧光检测器（激发波长245 nm、发射波长360 nm）。
    GAIN置16，Span置Max。
    柱：C18 10um（Radial pak cartridges）。
    流动相：甲醇+0.01tool／L KH2P04（1+1）。
    流速：1.3 mL／min。
    ②进样量：10 uL。
5.检测步骤
    ①样品提取与净化：准确称取样品10 g于具塞锥形瓶中，加50 mI。氯仿，振荡30 min，过滤于层析柱中，用氯仿+正己烷（1+1）8 mI，，氯仿+甲醇（9+1）10 mL，淋洗除杂质，zui后用20 mL丙酮+水（99+1）洗脱黄曲霉毒素，收集于烧杯中，在50℃水浴中挥干溶剂，再用氯仿分次将残渣洗人2 mL具塞试管中，并于50℃水浴中通Nz吹干。
    ②衍生化反应：向具塞试管中加200uI。正己烷，50uL三fu乙shuan，将盖盖紧，充分混匀1 min，静置30 rain后用Nz吹干。加100uL流动相，充分混匀，待检。
    ③标准液的处理：取适量标准溶液，按样品处理方法萃取、净化和衍生化反应，定容，使AFTBl、AFTMlzui后浓度均为0.1 ng·uL-1。
    AFT保留时间及标准色谱图：保留时间（min） ：AFTM1 3.36，AFTG1 4.72，AFTB1 16.00，FT G2 10.12，AFTB2 14.40。
6.说明
    ①本法应在1天内完成检测，否则结果偏低。
    ②层析柱中硅镁吸附剂应先用氯仿调为糊状加入。