导读：的工作原理是是物质对光的选择吸收和琅伯-比尔定律。而琅伯-比尔定律的限制性条件有如下三点：
  a.通过溶液的光必须是平行的;
  b.通过溶液的光必须是单色光;
  c.待测溶液必须是纯净的、均匀的且浓度不宜过高，这是琅伯-比尔定律首要的三个前提条件。
当然在实际的的制造和使用过程中这三个条件是不可能达到的，原因如下： 
  a.因为光是直线传播的，在分光光度计制造过程中，灯源发出的光是发散的，经过聚焦镜进行聚焦等直到经过溶液的整体过程中，光是不可能平行的。
  b.灯源发出的光是复合光，经过狭缝，再经过光栅分光等步骤，因为受到狭缝和光栅本身的限制，光栅分光不可能达到纯单色光。还有光度计的整体设计问题，光度计不可能没有其它的杂光存在。
  c.用户的溶液也不可能是纯净的，也会含有一些杂质，这些对光度的吸收都会存在影响。除以上三个方面的影响外，在实际的光度计应用过程中还会存在其他因素的影响，例如：
1、经过比色皿的光是否垂直;
2、比色皿宽度是否为10mm的标准值;
3、测试波长是否准确;
4、程序设计是否存在漏洞等等，都会直接影响到利用琅伯-比尔定律计算出的结果。
所以在日常的测试过程中，得出的结果和琅伯-比尔定律有些偏差是很正常的，只是我们关注偏差多少的问题。

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