氨基柱正反相都可以使用
时间:2023-02-17 阅读:159
对于新氨基柱,首先应详细阅读使用说明书,了解柱子出厂保存溶剂。一般出厂会保存在正相溶剂中,如果保存溶剂与你将要使用的流动相极性不同不互溶,请先用异丙醇过渡。过渡过程中应注意异丙醇粘度较大,会导致柱压很高,应使用小流速过渡。
I)当使用反相模式时,用前请使用异丙醇小流速过夜平衡色谱柱。流速建议0.1-0.2mL/min,之后再转换到99%乙腈冲洗20柱体积,然后转换到和流动相相同比例的不含盐的乙腈水体系冲洗20柱体积。
II)当使用正相模式时,如与出厂保存溶剂互溶,可使用流动相直接冲洗20倍柱体积;如不互溶请用异丙醇过渡。
如果大家是用于正相的体系:
1. 推荐先用正己烷-乙腈(99:1)以0.5ml/min的流速冲10倍柱体积,再根据流动相选用极性相近的氯仿或二氯甲烷以相同的流速冲10倍柱体积,最后换成你实验的流动相
2.正相使用时,不宜分析含醛基、羰基的化合物,不可用于还原糖的分析;流动相要脱气,并不得含有羰基化合物和过氧化物(质量不好的、四氢呋喃含有少量)
3. 任何时候更换流动相时都要确保新流动相与柱子原保存液可互溶。
简单来说,正相条件下使用的氨基柱参照硅胶柱的清洗方法;反相条件下使用的氨基柱参照C18的清洗方法。
I)正相使用时,将柱子冲洗干净后,用正己烷-乙腈(99:1)保存(即出厂模式)。
II)反相使用时,如短期不用,可用甲醇或乙腈保存;长期不用时需用异丙醇置换然后保存在正相模式下(即出厂模式)