HILIC色谱柱的柱效影响
时间：2023-02-17 阅读：85
一支HILIC色谱柱的优劣需要用一定的技术指标来进行评价。一个合格的HILIC色谱柱评价报告应该给出HILIC色谱柱的各项基本参数包括填充载体的种类、柱长内径、柱效、粒度等方面。评价液相色谱仪HILIC色谱柱的系统应满足相当高的要求，一方面是色谱仪器设备系统的中死体积应尽可能小，另一方面是其采用的试样样品以及操作条件应当合理，在此合理条件下HILIC色谱柱的试样样品可以分离并有适当的保留时间。色谱是一种分离分析方法，分离是其核心。因此起到分离作用的HILIC色谱柱是色谱系统的核心。色谱仪对HILIC色谱柱的要求是选择性好，柱效高且分析速度快。用于分析的各种微粒填料如以以硅胶为基质的键合相及多孔硅胶、氧化铝、多孔碳及有机聚合物微球等粒度一般为3至10μm，柱效的理论值可以达到五至六万每米。对于一般分析只需要五千塔板数的柱效；其对于同系物分析只要五百塔板数即可。对于分离困难的物质可以采用高达两万塔板数的柱子，因此一般十至三十厘米的柱长就能够满足复杂混合物分析的要求。
HILIC色谱柱在线过滤器的作用是防止颗粒在柱头累计，优点是基本不影响柱效， 在需要高柱效的时候常用， 常更换的消耗品是滤芯和垫圈保护柱的作用是防止柱子被化学污染。 缺点是多数保护柱影响HILIC色谱柱的柱效， 特别是在用微柱时，常用的是普通 自装填料的保护柱。zui近新出的一些保护柱例如S e n t r y - g u a r d保护柱， 它的特点是高质量、 高 效填料、 增加分析柱效、 对脏样品载荷能力大 ， 能延长HILIC色谱柱的寿命，手可拧紧接头，安装时不需要工具， 省时省， 可换芯式设计， 能采用各种不同的填料， 主要适用于非常脏非常复杂的样品本底， 例如生化样品， 环境样品和食品等，或者不想做太多的圃相萃取，不想降低柱效果等情况。
HILIC色谱柱系统是由储液器、泵、进样器、HILIC色谱柱、检测器、记录仪等几部分组成。工作原理是储液器中的流动相被高压泵打入系统,样品溶液经进样器进入流动相,被流动相载入HILIC色谱柱(固定相) 内, 由于样品溶液中的各组分在两相中具有不同的分配系数, 在两相中作相对运动时, 经过反复多次的吸附- 解吸的分配过程, 各组分在移动速度上产生较大的差别, 被分离成单个组分依次从柱内流出, 通过检测器时, 样品浓度被转换成电信号传送到记录仪,数据以图谱形式打印出来。
拿到一根新HILIC色谱柱时，一定要先看其使说明，然后测柱效，定期检测柱效， 保留在新HILIC色谱柱上得到的色谱图，并记录条件， 定期检测仪器的谱带展宽。 若应用于在线监测， 应对HILIC色谱柱提供在线的物理保护和化学保护， 例如采取安装在线过滤器， 自装填料保护柱和预装保护柱等。