HILIC色谱柱分析法对样品有一定的要求
时间：2023-02-17 阅读：47
HILIC色谱柱亲水作用色谱是一种直接分离极性和亲水性化合物的色谱技术，它以亲水性的填料作为固定相，以水、有机溶剂和缓冲液作为流动相洗脱剂。在HILIC方法中，洗脱顺序和反相色谱正好相反，即极性越大，保留时间越长。先关掉计数器；当执行打印操作时，打印机上须有打印纸，否则会损伤打印头。
HILIC色谱柱流程是载气由高压钢瓶中流出，经减压阀降压到所需压力后，通过净化干燥管使载气净化，再经稳压阀和转子流量计后，以稳定的压力、恒定的速度流经气化室与气化的样品混合，将样品气体带入色谱柱中进行分离。分离后的各组分随着载气先后流入检测器，然后载气放空。检测器将物质的浓度或质量的变化转变为一定的电信号，经放大后在记录仪上记录下来，就得到色谱流出曲线。根据色谱流出曲线上得到的每个峰的保留时间，可以进行定性分析，根据峰面积或峰高的大小，可以进行定量分析。
HILIC色谱柱法是指用气体作为流动相的色谱法。由于样品在气相中传递速度快，因此样品组分在流动相和固定相之间可以瞬间地达到平衡。另外加上可选作固定相的物质很多，因此HILIC色谱柱法是一个分析速度快和分离效率高的分离分析方法。近年来采用高灵敏选择性检测器，使得它又具有分析灵敏度高、应用范围广等优点。
HILIC色谱柱分析法对样品有一定的要求。进行分析的样品应是有机溶液，水溶液中的有机物一般不能测定，须进行萃取分离变为有机溶液，或采用顶空进样技术。有些化合物极性太强，在加热过程中易分解，例如有机酸类化合物，此时可以进行酯化处理，将酸变为酯再进行分析，由分析结果可以推测酸的结构。如果样品不能汽化也不能酯化，那就只能进行分析了。HILIC色谱柱进行分析的样品是水溶液或甲醇溶液，LC流动相中不应含不挥发盐。
HILIC色谱柱的流动向为惰性气体，气-固色谱法中以表面积大且具有一定活性的吸附剂作为固定相。当多组分的混合样品进入色谱柱后，由于吸附剂对每个组分的吸附力不同，经过一定时间后，各组分在色谱柱中的运行速度也就不同。吸附力弱的组分容易被解吸下来，*先离开HILIC色谱柱进入检测器，而吸附力*强的组分*不容易被解吸下来，因此最后离开色谱柱。如此，各组分得以在色谱柱中彼此分离，顺序进入检测器中被检测、记录下来。