一、色谱图中未出峰
 

　　解决方法：系统未进样或样品分解；泵未输液或流动相使用不正确；检测器设置不正确；针对以上情况成因作相应调整即可。
 

　　二、一个峰或几个峰是负峰。
 

　　解决方法：流动相吸收本底高；进样过程中进入空气；样品组分的吸收低于流动相。
 

　　三、所有峰均为负峰。
 

　　解决方法：信号电缆接反或检测器输出极性设置颠倒；光学装置尚未达到平衡。
 

　　四、所有峰均为宽峰。
 

　　解决方法：系统未达到平衡；溶解样品的溶剂极性比流动相差很多；色谱柱尺寸及类型选择不正确；色谱柱或保护柱被污染或柱效降低；温度变化造成的影响。
 

　　五、所出峰比预想的小
 

　　解决方法：样品黏度过大；进样品故障或进样体积误差；检测器设置不正确.定量环体积不正确；检测池污染；检测器灯出现问题。
 

　　六、保留时间变化
 

　　可能的原因 : 解决方法
 

　　1.柱温变化 : 柱恒温
 

　　2.等度与梯度间未能充分平衡 : 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱
 

　　3.缓冲液容量不够 : 用>25mmol/L的缓冲液
 

　　4.柱污染 : 每天冲洗柱
 

　　5.柱内条件变化 : 稳定进样条件,调节流动相
 

　　6.柱快达到寿命 : 采用保护柱
 

　　七、保留时间缩短
 

　　可能的原因 : 解决方法
 

　　1.流速增加 : 检查泵,重新设定流速
 

　　2.样品超载 : 降低样品量
 

　　3.键合相流失 : 流动相PH值保持在3-7.5检查柱的方向
 

　　4.流动相组成变化 : 防止流动相蒸发或沉淀
 

　　5.温度增加 : 柱恒温
 

　　八、保留时间延长
 

　　可能的原因 : 解决方法
 

　　1.流速下降 : 管路泄漏,更换泵密封圈,排除泵内气泡
 

　　2.硅胶柱上活性点变化 : 用流动相改性剂,如加三乙胺,或采用碱至钝化柱
 

　　3.键合相流失 : 流动相PH值保持在3-7.5检查柱的方向
 

　　4.流动相组成变化 : 防止流动相蒸发或沉淀
 

　　5.温度降低 : 柱恒温
 

　　九、肩峰
 

　　可能的原因 : 解决方法
 

　　1.样品体积过大 : 用流动相配样,总的样品体积小于峰的15%
 

　　2.样品溶剂过强 : 采用较弱的样品溶剂
 

　　3.柱塌陷或形成短路通道 : 更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件
 

　　4.柱内烧结不锈钢失效 : 更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品
 

　　5.进样器损坏 : 更换进样器转子
 

　　十、鬼峰
 

　　可能的原因 : 解决方法
 

　　1.进样阀残余峰 : 每次用后用强溶剂清洗阀,改进阀和样品的清洗
 

　　2.样品中未知物 : 处理样品
 

　　3.柱未平衡 : 重新平衡柱,用流动相作样品溶剂 (尤其是离子对色谱)
 

　　4.三(TFA)氧化(肽谱) : 每天新配,用抗氧化剂
 

　　5.水污染(反相) : 通过变化平衡时间检查水质量，用HPLC级的水
 

　　十一、基线噪声
 

　　可能的原因 : 解决方法
 

　　1.气泡(尖锐峰) : 流动相脱气,加柱后背压
 

　　2.污染(随机噪声) : 清洗柱,净化样品,用HPLC级试剂
 

　　3.检测器灯连续噪声 : 更换氘灯
 

　　4.电干扰(偶然噪声) : 采用稳压电源,检查干扰的来源(如水浴等)
 

　　5.检测器中有气泡 : 流动相脱气,加柱后背压
 

　　十二、峰拖尾
 

　　可能的原因 : 解决方法
 

　　1.柱超载 : 降低样品量,增加柱直径采用较高容量的固定相
 

　　2.峰干扰 : 清洁样品,调整流动相，使用更长的色谱柱
 

　　3.硅羟基作用 加三乙胺,用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相PH值,钝化样品
 

　　4.柱内烧结不锈钢失效 : 更换烧结不锈钢,加在线过滤器,过滤样品
 

　　5.柱塌陷或形成短路通道 : 更换色谱柱,采用较弱腐蚀性条件
 

　　6.死体积或柱外体积过大 : 连接点降至低,对所有连接点作合适调整,尽可能采用细内径的连接管
 

　　7.柱效下降 : 用较低腐蚀条件,更换柱,采用保护柱，活化色谱柱
 

　　十三、峰展宽
 

　　可能的原因 : 解决方法
 

　　1.进样体积过大 : 用流动相配样,总的样品体积小于峰的15%
 

　　2.在进样阀中造成峰扩展 : 进样前后排出气泡以降低扩散
 

　　3.数据系统采样速率太慢 : 设定速率应是每峰大于10点
 

　　4.检测器时间常数过大 : 设定时间常数为感兴趣峰半宽的10%
 

　　5.流动相粘度过高 : 增加柱温,采用低粘度流动相
 

　　6.检测池体积过大 : 用小体积池,卸下热交换器
 

　　7.保留时间过长 : 等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱
 

　　8.柱外体积过大 : 将连接管径和连接管长度降至小
 

　　9.样品过载 : 进小浓度小体积样品
 

　　十四、峰分叉
 

　　可能的原因：解决方法
 

　　1.保护柱或分析柱污染：取下保护柱再进行分析。如果必要更换保护柱。如果分析柱阻塞，拆下来清洗。如果问题仍然存在，可能是柱子被强保留物质污染，运用适当的再生措施。如果问题仍然存在，入口可能被阻塞，更换筛板或更换色谱柱。
 

　　2. 样品溶剂不溶于流动相：改变样品溶剂。如果可能采取流动相作为样品溶剂。
 

　　十五、基线漂移
 

　　可能的原因:解决方法
 

　　1、柱温波动。(即使是很小的温度变化都会引起基线的波动。通常影响示差检测器、电导检测器、较低灵敏度的紫外检测器或其它光电类检测器)：控制好柱子和流动相的温度，在检测器之前使用热交换器