腌制品（蜜钱）中人工合成色素的检测方法
时间：2014-11-09 阅读：1567
人工合成色素是以苯、甲苯、萘等化工产品为原料,经过较复杂的工艺过程合成的,故具有一定的毒性,但因其成本低,色泽鲜艳,着色力强而被广泛使用。但使用过量会对人体产生有害作用, 因而我国规定了人工合成色素的使用*和检测方法。至目前止, 我国批准使用的食用合成色素中zui常用的有胭脂红、苋菜红、柠檬黄、日落黄和亮蓝等, 使用范围于饮料、配制酒、糖果、糕点和青梅等, 禁止用于腌（蜜钱）类、鱼类、及其制品（红肠肠衣除外）, 且诱惑红在腌（蜜钱）灌肠中*规定为0.015 g/kg, 西式火腿中*为0.025 g/kg。由于国标中人工合成色素检测方法中没有包括熟食腌（蜜钱）制品, 为了配合食品安全的监督, 本文借鉴国标中人工合成色素的前处理方法, 加以改进, 对腌（蜜钱）制品中的6 种人工合成色素进行分离检测, 得到了满意结果。
1 材料与方法
1.1 仪器与试剂
仪器: LC-500HPLC液相色谱仪
试剂: 人工色素标液（ 柠檬黄, 苋菜红, 胭脂红, 日落黄, 亮蓝） : 0.5 mg/mL, 国家标准物质中心提供; 诱惑红（ 80%） : SIGMA- ALDRICH,Inc 提供; 聚酰胺粉: 100 目; 醋酸铵, 石油醚: （ 30- 60 ℃） ; 柠檬酸溶液:20 g/L; 甲醇- 甲酸溶液: （ 6∶4）V/V; 无水乙醇—氨水—水溶液: （ 7∶2∶1）V/V;甲醇（ 色谱纯） ; 冰乙酸。所用试剂除甲醇外均为分析纯。
、仪器配置
| Pos | Product Number | Qty |
| 1 | TZ500-010 | 2 |
| 高压* | ||
| LC-500A Pump Includes pump, solvent cabinet, 2 solvent bottles and CAN cable. | ||
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| 2 | TZ500-010 | 1 |
| MIXER-500静态混合器 | ||
| Model 500 Mixer | ||
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| 4 | TZ500-016 | 1 |
| 仪器启动工具包 | ||
| HPLC Starter Kit incl. 0.17mm id cap | ||
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| 5 | TZ500-040 | 1 |
| SPD-500可变波长紫外检测器 | ||
| SPD-500 Variable Wavelength Detector Includes variable wavelength detector with deuterium lamp and CAN cable. No flow cell included. | ||
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| 6 | TZ500-027 | 1 |
| 7725i手动进样阀 | ||
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| 7 | TZ500-028 | 1 |
| C18 250*4.6 | ||
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| 8 | TZ500-45 | 1 |
| 溶剂托盘 | ||
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| 9 | TZ500-112 | 1 |
| 色谱工作软件 | ||
| HPLC 2D ChemStation Software For data acquisition. | ||
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| 10 | 恒温水浴 HH-2 | 1 |
| 柱温箱 | ||
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| 11 | 样品前处理包 | 1 |
| （超声波1台，真空泵1台，溶剂过滤器1套， | ||
| 滤器、滤膜各2包） | ||
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定量方法:外标法
1.3 样品处理
1.4 计算
X = C ×V ×1000
m ×1000
X ─ 试样中合成色素的含量, g/kg;
m ─ 样品质量, g;
V ─ 样品定容后的体积, mL;
C ─ 测定用样品液中合成色素的浓度, mg/mL
2 结果
2.1 标准曲线线性关系实验分别配制各组分浓度相等的混合标准系列, 浓度为0.01、0.04、0.06、0.08、0.10 mg/mL （ 其中诱惑红的浓度折算80%） , 进样量20μL 进行液相色谱分析, 用峰面积与浓度进行线性回归。各自的特征光谱图如图1 所示,及各组分的出峰情况如图2 所示,线性方程及各自相关系数r 如表2 所示:表2! 各组分人工合成色素标准曲线回归方程及相关系数
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2.2 zui低检测量
采用3 倍信噪比时所对应的浓度, 由此计算出zui低检出量为: 柠檬黄1.4×10- 5 mg/mL, 苋菜红2.8×10- 5 mg/mL, 胭脂红2.8×10- 5 mg/mL, 日落黄3.0×10- 5 mg/mL, 诱惑红1.6×10- 5 mg/mL, 亮蓝6.0×10- 4 mg/mL。
2.3 回收率实验
将样品精密量取后, 分别加入一定量的混合标准溶液制成高、中、低3 个浓度的加标样品, 每个浓度取5 个
平行样品, 经前处理过滤后, 用HPLC 分析测得其回收率分别为柠檬黄: 93.7%～96.2%、苋菜红: 88.6%～95.4%、胭脂红: 90.3%～100.3%、日落黄: 94.3%～98.7%、诱惑红:94.8%～98.1%、亮蓝: 89.8%～94.4%（ 见表3） 。
3 讨论
由于国标中关于合成色素的检测无腌（蜜钱）制品的处理方法, 故本文借鉴国标中对其他产品的处理方法, 又因柠檬黄、苋菜红、胭脂红、日落黄、诱惑红、亮蓝等人工合成色素均为水溶性, 依据相似相溶原理采用石油醚去除腌（蜜钱）制品中的油脂, 从而减少了因油脂堵塞G3 漏斗导致的抽滤不畅, 大大提高了色素的提取速度。同时也减少了样品中色素的损失。实现了腌（蜜钱）制品中6 种常用人工合成色素的同时快速检测。
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