生物制药微课堂｜宿主细胞残留蛋白分析，如何获得更佳结果？
时间：2020-08-25 阅读：241
生物制药微课堂｜宿主细胞残留蛋白分析，如何获得更佳结果？
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LCMS分析方法越来越多的用于宿主细胞残留蛋白(HCP)的分析，HCP分析的难点见往期wei信稿“生物制药微课堂|第二期-宿主细胞残留蛋白如何分析？”。如何获得you秀的基于LC-MS的HCP分析结果? 答案将在本期分享的两场关于HCP的LCMS分析的网络讲座，每场都有详细的样品前处理，LCMS方法和数据处理的详细介绍，可谓干货满满，供有需求的老师参考。
Webinar 1:
Data Visualizations for Routine Host Cell Protein Analysis by LCMS
讲师介绍
博士：
Andrew Williamson
赛默飞生物制药销售专家
Andrew Williamson博士是赛默飞生物制药销售专家。在此之前，Andrew在赛默飞公司担任蛋白质组学专家，此前他在曼彻斯特大学克里斯蒂医院的蛋白质组学实验室工作并管理该实验室。在此期间，安德鲁从事了许多基于肿瘤项目的蛋白质组学分析，研究zhi疗的关键指标和生物标志物的发现。在此期间，Andrew还与合作者合作分析了多种干细胞和癌症样本，包括小鼠、人和诱导多能干细胞。
讲师介绍
博士：
Michelle English
Protein Metrics Inc.
的成功科学家
Michelle English 博士是Protein Metrics Inc.的客户成功科学家，在该公司，她专注于帮助客户使用质谱对早期和后期产品表征。在加入Protein Metrics公司之前，Michelle是辉瑞公司的一名科学家，并在弗吉尼亚大学的Hunt实验室工作。
看点：
HCP的完整解决方案及可视化的数据展示
生物药生产过程中会产生产品不需要的宿主细胞残留蛋白(HCP)，大部分HCP可以通过纯化去除。监管指南规定在上市前必须确定生物药中残留的HCP水平。LC-MS技术在过去几年中得到了快速发展，但迄今为止该技术对分析人员专业技能要求高和需要对数据进行手工分析。分析挑战包括样品宽动态范围，极低的HCP丰度，差的序列覆盖率，等等。此外，假阳性和假阴性一样危险，会造成不能重现，这也阻碍了LC-MS成为常规的HCP分析手段。
讲座关键点：
01.为什么LC-MS在生物药分析中越来越常用
02.如何对非质谱专家用户有效的展示数据
03.如何更快提供可信的结果
该报告详细介绍了样品前处理方法、LC-MS方法和数据处理。非变性SMART Digest酶解能去除大部分主成分，提高HCP鉴定的数目。高灵敏度和采集速度快的Orbitrap Exploris 480 质谱仪进一步提高HCP鉴定数目，并且重现性好。软件Proteome Discoverer和Protein metrics用于数据的分析，得到可视化好的HCP鉴定和相对定量的结果和报告。
流程化的数据处理
(点击查看大图)
Webinar 2:
A Data-Independent Acquisition (DIA) library based approach for Host cell protein analysis on the Thermo Scientific Orbitrap platform
讲师介绍
博士：
Ian Anderson
赛默飞生物制药销售专家
Ian Anderson博士在Allergan工作了6年多，专注于从抗体到基因zhi疗载体等多种生物制药产品的质谱鉴定。在此之前，他在SGS-M-Scan工作，开发用于表征生物药品和生物仿制药的新型质谱方法。
看点：
基于DIA采集模式的HCP分析
现在用于HCP分析方法，绝大部分用的是数据依赖性采集(DDA)的方法。数据非依赖性采集(DIA)与DDA相比，不丢失任何信息、灵敏度更高，适合用于HCP分析。该报告讲解了基于Thermo Scientific Orbitrap Fusion Lumos三合一质谱仪和Orbitrap Exploris 480质谱仪开发HCP的DIA方法，以及如何在两个质谱系统设置合适参数。该报告将详细介绍好的HCP数据库如何建立以及构建该库的*方式，并列举了如何在生物制药过程开发中使用该方法的例子。
讲座关键点：
01.讨论基于高分辨质谱平台的HCP分析方法
02.演示使用DIA方法进行HCP的分析
03.该方法在生物制药开发过程中应用
DIA分析LCMS平台
本报告详细介绍了DIA采集模式用于HCP分析的方法建立。DDA是好的建立谱图库的数据采集模式，数据不丢失、高灵敏度的DIA采集的数据可以检索该谱图库从而得到可信的HCP鉴定结果。本报告对DDA和DIA的质谱参数设置进行了详细的解读，且该方法可以在Orbitrap Fusion Lumos三合一质谱仪和Orbitrap Exploris 480质谱仪相互转移，表明该方法的稳健性好、重复性好。
DIA 用于HCP分析的实验流程
使用Orbitrap高分辨质谱平台Exploris 480和Orbitrap Fusion Lumos，能够实现鉴定灵敏度及动态范围的进一步提高。那么如何进行合理的实验设计？质谱方法的参数设置？鉴定结果可做到什么程度？这些问题都会在以上报告中给出答案，精彩不要错过！