引言：维生素是人和动物为维持正常的生理功能而必需从食 物中获得的一类微量有机物质，在人体生长、代谢、发 育过程中发挥着重要的作用，在食品、保健品及药品 中的测定也变得越来越频繁。维生素是个庞大的家族，目前所知的维生素就有几十种，大致可分为脂溶性和水 溶性两大类。高效液相色谱法作为一种快速分离、能同 时测定多种物质的仪器分析方法，在多种维生素同时测 定方面具有*的优势。但是由于水溶性维生素和脂溶 性维生素性质差异很大，所以很少将其在同一个方法里 进行检测。
 

　　本方法采用 Thermofisher 的针对极性化合物有特殊选择性 的 Acclaim PolarAdvantage II C18 色谱柱，可以很有效的将 9 种水溶性维生素得到很好的保留和分离，同时能够在大有机相存在的情况下，对脂溶性维生素得到很好的洗脱 和分离，实现了一个方法解决两类性质差异很大的维生 素的同时分离。
 

　　仪器配置 Thermo Ultimate 3000 系统： 泵：DGP-3600 自动进样器：WPS-3000SL 柱温箱：TCC-3000 检测器：DAD-3000 色谱软件：Chromeleon 7.1
 

　　测定条件 分析柱： Acclaim PolarAdvantage II C18, 4.6×250mm, 5µm, PN: 063199, SN: 001461 流动相： A：0.025%TFA 的水；B：乙腈；C：甲醇； 梯度见表 1. 进样量：10µL 柱温：室温 检测器波长：见表 2.
 

　　样品处理 按照注射液冻干剂说明要求，向其中加入 5mL 超纯水， 使其充分溶解，将溶解后的注射液通过 0.22 μm 尼龙滤膜 过滤后，使用超纯水稀释 10 倍，待测。
 

　　实际样品分析 按照样品处理方法测定了注射液样品，测定结果如下：
 

　　讨论与建议：本实验针对注射液的特点，将 9 种水溶性维生素和 3 种脂 溶性维生素放在同一个分析方法里进行检测，从结果中 可以看到分析结果良好。而因为水溶液中维生素C不稳定， 所以有随着时间推移峰面积减少的现象，所以推荐对于 维生素 C 的分析需要现做现配样品。 因为水溶性维生素比较易溶于水，而脂溶性维生素必须 溶解在有机溶剂里，而且如果有机溶剂中出现比较少的 水也会导致脂溶性维生素的析出以及影响水溶性维生素 中四水合辅羧酶、核黄素和烟酰胺的峰形，所以标准品 中分别将水溶性维生素和脂溶性维生素分开混合测量。 因为样品为冻干剂，且按照使用要求 5mL 超纯水溶解后 依然浓度很高，所以再次将样品稀释 10 倍后进行分析。