诊状

可能的原因

解 决 方 法

（ 一 ）

保留时间变化

1. 柱温变化

柱恒温

2. 等度与梯度间未能充分平衡

至少用 10 倍柱体积的流动相平衡柱

3. 缓冲液容量不够

用 >25mmol/L 的缓冲液

4. 柱污染

每天冲洗柱

5. 柱内条件变化

稳定进样条件 , 调节流动相

6. 柱快达到寿命

采用保护柱

（ 二 ）

保留时间缩短

1. 流速增加

检查泵 , 重新设定流速

2. 样品超载

降低样品量

3. 键合相流失

流动相 PH 值保持在 3~7.5 检查柱的方向

4. 流动相组成变化

防止流动相蒸发或沉淀

5. 温度增加

柱恒温

（ 三 ）

保留时间延长

1. 流速下降

管路泄漏 , 更换泵密封圈 , 排除泵内气泡

2. 硅胶柱上活性点变化

用流动相改性剂 , 如加三乙胺 , 或采用碱至钝化柱

3. 键合相流失

同前 （ 二 ）3

4. 流动相组成变化

同前 （ 二 ）4

5. 温度降低

同前 （ 二 ）5

（ 四 ）

出现肩峰或分叉

1. 样品体积过大

用流动相配样 , 总的样品体积小于*峰的 15%

2. 样品溶剂过强

采用较弱的样品溶剂

3. 柱塌陷或形成短路通道

更换色谱柱 , 采用较弱腐蚀性条件

4. 柱内烧结不锈钢失效

更换烧结不锈钢 , 加在线过滤器 , 过滤样品

5. 进样器损坏

更换进样器转子

（ 五 ）

鬼峰

1. 进样阀残余峰

每次用后用强溶剂清洗阀 , 改进阀和样品的清洗

2. 样品中未知物

处理样品

3. 柱未平衡

重新平衡柱 , 用流动相作样品溶剂 （ 尤其是离子对色谱 ）

5. 水污染 （ 反相 ）

通过变化平衡时间检查水质量,用 HPLC 级的水

（ 六 ）

基线噪声

1. 气泡 （ 尖锐峰 ）

流动相脱气 , 加柱后背压

2. 污染 （ 随机噪声 ）

清洗柱 , 净化样品 , 用 HPLC 级试剂

3. 检测器灯连续噪声

更换氘灯

4. 电干扰 （ 偶然噪声 ）

采用稳压电源 , 检查干扰的来源 （ 如水浴等 ）

5. 检测器中有气泡

流动相脱气 , 加柱后背压

（ 七 ）

峰拖尾

1. 柱超载

降低样品量 , 增加柱直径采用较高容量的固定相

2. 峰干扰

清洁样品 , 调整流动相

3. 硅羟基作用

加三乙胺 , 用碱致钝化柱增加缓冲液或盐的浓度降低流动相 PH 值 , 钝化样品

4. 同前 （ 四 ）4

同前 （ 四 ）4

5. 同前 （ 四 ）3

5. 同前 （ 四 ）3

6. 死体积或柱外体积过大

连接点降至zui低 , 对所有连接点作合适调整 , 尽可能采用细内径的连接管

7. 柱效下降

用较低腐蚀条件 , 更换柱 , 采用保护柱

（ 八 ）

峰展宽

1. 进样体积过大

同 （ 四 ）1

2. 在进样阀中造成峰扩展

进样前后排出气泡以降低扩散

3. 数据系统采样速率太慢

设定速率应是每峰大于 10 点

4. 检测器时间常数过大

设定时间常数为感兴趣*峰半宽的 10%

5. 流动相粘度过高

增加柱温 , 采用低粘度流动相

6. 检测池体积过大

用小体积池 , 卸下热交换器

7. 保留时间过长

等度洗脱时增加溶剂含量也可用梯度洗脱

8. 柱外体积过大

将连接管径和连接管长度降至zui小

9. 样品过载

进小浓度小体积样品