暗视野显微镜【Dark field Microscope】的原理和结构特点：在日常生活中，室内飞扬的微粒灰尘是不易被看见的，但在暗的房间中若有一束光线从门缝斜射进来，灰尘便粒粒可见了，这是光学上的丁达尔现象。


暗视野显微镜就是利用此原理设计的。它的结构特点主要是使用遮光板或暗视野聚光器，常用的是抛物面聚光器，使光源的光束被阻挡．不能由下而上地通过标本进入物镜。从而使光线改变途径，倾斜地照射在观察的标本上，标本遇光发生反射或散射，散射的光线投入物镜内，因而整个视野是黑暗的。在暗视野中所观察到的是被检物体的衍射光图像．并非物体的本身，所以只能看到物体的存在和运动，不能辨清物体的细微结构。但被检物体为非均质时，并大于1／2波长，则各级衍射光线同时进入物镜，在某种程度上可观察物体的构造。一般暗视野显微镜虽看不清物体的细微结构，但却可分辨0.004um以上的微粒的存在和运动，这是普通显微镜(的分辨力为0.2um)所不具有的特性，可用以观察活细胞的结构和细胞内微粒的运动等。

暗视野显微镜遮光板的制作：普通显微镜只要聚光器是可以拆卸的，支架的口径适于安装暗视野聚光器，即可改装成暗视野显微镜。在无暗视野聚光器时，可用厚黑纸片制作一个遮光板，放在普通显微镜的聚光器下方的滤光片框上，也能得到暗视野效果。
(1)．将显微镜聚光器调到位置，用低倍镜对好焦距。
(2)．取下目镜，从镜筒中观察并调节光阑的大小，使其与镜筒中所见物镜的视野相等。
(3)．用厚黑纸剪制挡光板。外圈直径与滤光片框架相同，部分的大小与调节好的光阑孔径一样(可用半透明的小纸片，放在通光孔处聚光镜镜面上，纸上显示的光斑即为光阑的孔径，再用圆规量取大小)。
(4)．将挡光板放在滤光片框架上，开大光阑进行样品观察。

上海沪杏光学2015