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要对尺寸从几百微米到几纳米范围内的结构进行成像,通常需要不同放大倍数的物镜。Apotome 3具有三种不同几何形状的栅格,可保证每一颗物镜成像的高分辨率。您只需要关注实验本身,因为系统可自动选择合适的栅格,时刻确保获得高对比度的光学切片。与传统宽场荧光显微图像相比,Apotome 3能够显著提高轴向分辨率:您可以获得支持三维渲染的优质光学切片,厚的样品也不例外。
实验的复杂性和需求往往随着时间发生变化。因此您的设备不仅需要注重性能,还应具有灵活性。将Apotome 3与传统的金属卤化物灯、经济型LED白光光源或柔光、多色Colibri照明系统结合使用。使用时仅需更换滤色片,系统便会自动将栅格移至正确位置。任何染料都不受技术上的制约:不论是DAPI、Alexa488、Rhodamin、Cy5还是活体染料,如GFP或mCherry——Apotome 3都能够适应荧光和光源,生成您期望的优质清晰图像。
凭借结构照明的算法,您甚至可以借助蔡司Apotome 3通过反卷积进一步改善图像质量。在保留所有原始数据的同时,该系统还允许在宽场、光学切片以及反卷积的图像之间切换,实现出色的灵活性和兼容性。反卷积算法快速、稳健且易于使用,能够改善图像的横向和轴向分辨率。因对比度改善、光学分辨率更高且现有噪声得到抑制,您可以更好地识别样品更细微的结构。
您的相机能够检测到焦平面以外的光。根据试样的厚度和体积降低对比度和分辨率(图A:通过传统反射荧光照明法获取图像)。
蔡司Apotome 3可自动将匹配的栅格放入显微镜光路中,不受放大倍数的影响。减少不需要的背景荧光能够增加栅格的频率,使光学切片变得更薄。来自焦平面以外的图像信息则受到抑制(图B、C和D),因此改善了光学切片的对比度和分辨率。示例(图D)中,“低栅格”可优化切片厚度。此类图像尤其适用于3D分析以及通过渲染软件处理图像数据。
蔡司Apotome 3将栅格结构投射到样品的焦平面,随后使用扫描机构将其移至不同位置。Apotome 3在每一栅格位置都能够自动获取一张数字图像。系统使用算法将所有的图像处理成一个具有高对比度和分辨率的光学切片。产生的图像无栅格结构。
荧光激发光会穿过Apotome 3载玻片中的两块玻璃板。当栅格结构应用于块玻璃板时,栅格图案会被投影激发光中。扫描组件机构会倾斜第二块玻璃板,栅格图像便在样品的焦平面内平移。