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BD FACSAria™ III 流式细胞仪具有诸多的技术,多色性能出色,其简便易用也为更多的科研工作者打开了复杂的细胞分析的大门,成为流式的传奇制作。其精心设计的液流和光路系统,实现了信号检测的最da化。光胶耦合石英流动池以及八角形、三角形光路收集系统,整个系统具有超高的灵敏度和分辨率。
多色分析及分选性能
BD FACSAria™ III细胞仪的液流系统是由压力驱动的。正向空气压力使样本细胞通过光胶藕合的石英杯流动池。在流体力学的聚焦作用下,样本颗粒形成单一液流通过流动池,在流动池中,激光束与样本流正交。
BD FACSAria III的核心部位是石英杯流动池,她与激光器以及光胶耦合的荧光收集光路一起构成了一套真正的稳定性光路系统。为了得到更高的灵敏度,BD FACSAria III安装了最新一代石英杯流动池。它的设计帮助确保激光正好聚焦到样本流上,这样就可以产生zui强的信号,并收集到最多量的光信号。
稳定性光路使开机启动时间最短,并提高实验的可重复性,可以自动化进行每日质控。更重要的是,它也提高了光信号收集效率,信号分辨率更好,特别适合多色应用的需求,甚至在高速分选时同样具有光信号的高灵敏度和分辨率。
广受赞誉的可靠性和易操作性是该系统的特性
除其他功能外,BD FACSAria III中最新一代流动池的设计进一步提高了侧群细胞和细胞DNA周期分析的分辨率。
FACSAria III的分析性能,灵敏度,与最xin技术水平的分析型仪器的性能等同。这是因为其运用了与BD FACSCanto™ II和BD LSRFortessa™相同的光胶耦合流动池设计和稳定性光路结构。
这种设计的光学结构可以达到高数值孔径光学收集。流动池和喷嘴的设计能够使颗粒在分析区域降低流速以便收集最多光信号,之后颗粒在通过喷嘴后在液流中加速,从而进行高性能细胞分选。
由于BD FACSAria III光学和液流系统的精密设计,与传统的空气激发系统在相同的分析和分选速度时进行比较BD FACSAria III有更杰出光学检测灵敏度。
不同尺寸的喷嘴使用户分选不同大小的样本颗粒。喷嘴有四种尺寸可选:70微米、 85微米、 100微米和130微米。改进的喷嘴设计使得更换更为方便,且安装位置精确,不会发生偏差。这意味着在每次插入喷嘴后,可以得到可重复的液滴形态,不需要重新调节仪器设置,使仪器具有可重复的设置和校正状态。软件中包括了不同喷嘴的特异分选设置,使压力及分选设置与使用的喷嘴相匹配。
液流系统的创新,如易于插拔的喷嘴,自动化的分选设置,易于更换的滤光片等,使仪器设置更为方便和快捷。液流设计的特点包括一体化阀门组合和简易高效的液流管路。软件向导使无菌分选设置更简便和高效。此外,在样本运行后,样本采集管内外都会自动进行冲洗,达到最小残留,消除样本间的交叉污染。
BD FACSAria III的四个独立光斑
BD Accudrop技术简化了液滴延迟时间的确定
BD FACS™ Accudrop技术帮助使用者可以看到正确的最佳液滴延迟值,而在以前,这是无法用肉眼实现的。软件自动化操作,简化了液滴延迟的确定。一旦液滴延迟时间被确定,系统会自动调节并维持恒定的断点,此技术称为Sweet Spot。如果遇到管路堵塞,系统将自动停止分选,并保护收集管。
颗粒经过流动池后液流会加速通过喷嘴,并形成分选液滴。因为颗粒的检测在喷嘴上方,所以插入或移走喷嘴时,您都无需调整光路或液流。
更高效的多色检测
BD首chuang的在光学系统方面的革新设计能有效的最da化检测信号,并在多色检测中极大的提高每个颜色通道的灵敏度和分辨率。增强的灵敏度和分辨率意味着即便信号很弱的细胞群也可以轻易地被识别和分选。
光学系统方便优化多色检测和抗体组合的设计,以求达到最佳结果。用户可以选择照射样本细胞的激发光波长,以及引导散射光和荧光信号通过特定的滤光片到达检测器的收集光路。激发光和收集光路上的创新设计在减小激发光损失的同时,也显著改善了信号收集效率,从而使每个样本都能获取得到良好的信号。
激发光路的组成包括:多根引导光纤、固定波长的激光、光束整形装置和消色差聚焦透镜。各激光聚焦形成的光斑在空间上相互分离,并各自聚焦成形(9×65微米)。光斑聚焦越集中,荧光标记的微粒通过激发点时产生的信号就越强。光胶耦合的荧光收集物镜能最大限度的将发射光从检测点传递给荧光收集光路。由于光路和样本流均固定,仪器光路的正交状态在不同实验、不同日期间一直保持不变。
杰出的灵敏度和分辨率
手动调校光路会因为每次调校状态不同而导致实验结果有变化。而固定光路设计避免了这种问题,保证仪器光路稳定,对实验结果不会有影响。
八角形检测器中的光传播路径
光纤将发射光从光胶耦合石英杯传递给检测器接受装置。基于八角形和三角形设计的收集光路,能最大限度的检测来自每个激光束照射点的信号,其原理是让波长最长的光(光子能力最di)优先透射进入第一个光电倍增管(PMT),并通过一系列的长通二色分光镜将较短波长的光反射到下一个PMT下检测器。
这一设计是根据光反射比光透射更有效率这一原理。荧光信号以反射的形式传播到每一个PMT下检测器,并在到达检测器之前只通过2个滤片。因此可以在光信号损失最小的情况下完成荧光检测。
装置在每个PMT下检测器之前的带通滤镜允许波长范围内的荧光被收集。更重要的是,这种排列简化了光学阵列中滤镜和分光镜,滤光片更易更换,而且不需要任何校准就可达到更强的信号强度。
BD FACSAria III光学系统方面的诸多革新设计,例如专li的光胶耦合石英杯、八角形检测器和9×65μm大小的光斑,这些革新设计协同工作,以最大限度提高检测灵敏度和分辨率。通过精密的设计产生出这样一套更高效的光学系统,使得其能够使用较低功率激光,无需通过单纯提高激光器的功率来提升实验灵敏度和分辨率。而低功率激光又同时可以降低仪器运作的总体费用。
满足当前及未来需求
对于许多用户而言,一台gao端流式细胞仪的性能高低取决于其灵活性,而灵活性主要表现在能够同时检测的参数数量。BD FACSAria™ III可以支持六根激光器和四个独立光斑。可选的激光器包括:633 nm, 561 nm, 488 nm, 445 nm, 405 nm和375nm。并具有同时进行多达20个参数,18色的检测能力,有着强大的灵活性。
用户可以根据当前和未来的需求以及预算情况来配置仪器。以后还可以通过升级服务来增加BD FACSAria III的激光器数量,以提升其能力。除此之外,BD FACSAria或者BD FACSAria II的用户可以也通过升级服务获得BD FACSAria III的新的功能。
方便日后升级,紧随前沿技术
灵活设置你的 BD FACSAria III
最多同时安装6个激光器,最高同时检测18色,激光器可选:633, 561,488, 445, 405, 375 nm
与空气中激发得分选方式相比,BD FACSAria III独te高效的光学系统的设计使得使用成本降低。BD FACSAria III通过光纤来传导固体激光器所发出的激光,从而实现了灵敏度和分辨率的最da化。
与其他BD流式细胞分析仪和分选仪完mei兼容
无论是BD FACSAria™ III的仪器设置、数据获取或是数据分析,BD FACSDiva™软件都能够提供快捷有效的控制。BD FACSDiva软件被广泛地应用于一系列BD的流式细胞分析和分选仪,包括BDFACSCant,和BD™ LSR系统等。研究者的实验设计更为灵活方便,可以将优化好的实验条件和设置快速的转移到另一平台上。例如,分析实验的条件和设置可以轻松应用于分选实验。
BD FACSDiva软件具有仪器设置和追踪(CS&T)功能,能够帮助仪器完成基线设置,优化仪器的灵敏度和荧光分辨率。从而大幅减少了由于操作者的主观误判带来的结果错误,确保实验结果的一致稳定。它使得用户可以在仪器连续稳定的前提下快速完成特定实验的条件设置。仪器状态追踪功能会监测一系列仪器设置的数值,并给出状态报告,大大简化了日常质控的流程。Levey-Jennings图谱可以帮助用户了解他们的仪器状态确定是否需要进一步的维护处理。
流式细胞仪的设置和追踪
分选前的快速简单准备:
1. 打开细胞仪
2. 开启液流
3. 自动化完成仪器设置、质控和液滴延迟优化
4. 优化样品条件
5..分选开始
BD FACSDiva软件使得科研工作者能够使用自动的数据获取流程去完成多个数据的预览和保存。软件还能够管理数据获取模板、实验界面设计、以及补偿程序,方便数据获取。
为了高效便捷的分析,软件提供了自动设门方式、用户可选的图形结构和批处理功能。存储的数据可以通过图形、门、群体层级以及统计结果,在同一张BD FACSDiva工作表上实现完整分析。一旦整体工作表被保存,可以被用来分析同一实验中的多个样本管数据,从而大大节省时间。有助于提高效率的方式还有:用户自定义的批处理分析、自动化的设门调整、在分析不同数据间暂停、输出统计结果、在进到下一个数据文件前打印结果等等。
光胶耦合的石英杯流动室和电子处理系统协同作用下,每个检测颗粒的信息最da化。电子采样速率和颗粒在流动室中的流动速度精确匹配。每秒70,000个颗粒的上样速度下,采集到的数据保证了线性度和精确性(见下图)。
BD FACSAria III系统数据采集速率