氨基酸分析前处理中的小帮手
时间:2021-08-09 阅读:653
奖牌榜
2020东京 Olympic
近日最让人热血的话题莫过于2020东京 Olympic,北京时间8月8日,东京 Olympic的全部比赛已宣告结束,最终奖牌榜也出炉了。本届比赛,中国以38金的数量位于金牌榜第二,太棒了祖国的运动健儿们,为你们感到无比骄傲!
Olympic对于运动员而言,可谓是十年磨一剑,每一位都要经历日复一日的刻苦训练。在大量运动后,运动员需要及时补充和平衡在运动中损失的能量,而氨基酸能为机体和大脑提供能量,尤其对于运动员而言,身体对于能量的需求远远高于常人。今天我们带来的小科普就是关于氨基酸分析。
想要得到满意的氨基酸分析结果——样品前处理是关键!
在食品、动物饲料检测或者新药研发的过程中,研究员需要对蛋白质样品中的氨基酸种类及含量进行测定;要得到满意的氨基酸分析结果,不仅仅要注意样品的制备,更重要的是样品的处理。为了让蛋白质样品能分解成氨基酸便于后续检测,一般需要对样品进行水解处理。水解方法一般有三种,即酸水解,氧化水解和碱水解,其中,最为常用的是酸水解法。
酸水解法步骤
1.称取少量含蛋白质的样品于安瓿管中(切勿粘壁)
2.加入6mol/L HCL,定容,加入phenol
3.液氮冷冻,抽真空,融化安瓿管使其密封
4.3110℃,水解12/24/36/72h
5.水解后,冷却、混匀、开管、过滤,定容至50ml
6.取0.5ml滤液至浓缩仪中,60℃真空离心干燥,必要时加少许水,重复蒸干1-2次
7.加入样品稀释液,震荡混匀,过滤,供上机测定使用
英国GeneVac——溶剂蒸发工作站
EZ-2系列、HT系列耐酸型号则非常适合氨基酸前处理,氨基酸的前处理需要蛋白质通常用6N HCl水解,这个浓度的盐酸对传统的蒸发系统有很强的腐蚀作用,但是耐酸型号的GeneVac系统的内腔,转子和气体管路全部带PTFE涂层,可以轻松处理6N以上盐酸的浓缩。
其次,批处理量大,1.5ml样品一次可处理64个,效率高;无需氮气,冷阱回收酸蒸汽,防止污染,无后期成本。
因此,和传统的氮吹或旋蒸相比,新型GeneVac溶剂蒸发工作站的优势是采用抽真空,离心的方式进行样品浓缩,Dri-Pure这样的关键技术可以保证样品安全快速浓缩而且防爆沸,另可使样品富集,增加样品回收率。
高效浓缩、安全防爆沸
耐酸型号可处理6N 以上盐酸;
批量处理样品:一次可以处理几百个样品,加快研发效率;
Dri-Pure,有效防止样品暴沸,免于交叉污染;
处理高沸点溶剂:可处理 DMF、DMSO沸点较高的溶剂,处理溶剂的沸点可高达220℃;
样品自动转移功能:利用SampleGenie™技术直接干燥后的样品自动转移到样品瓶中储存或进行后续上机分析,无需二次转移;