想要延长hplc色谱柱寿命?先带您了解液相保护柱吧
时间:2022-12-31 阅读:622
一、色谱柱的堵塞:
任何来自流动相或样品的颗粒物质都会污染色谱柱滤网,一些颗粒还可能迁移到柱子填料中,这将导致柱子背压的增加。这给泵带来了更大的压力,并可能导致柱子沉降,产生空隙从而导致峰的分裂。高效液相色谱柱在使用过程中会遇到许多不同的物质,如缓冲液中的盐或流动相和样品中的杂质,这些物质可能比被分离的分析物有更少或更多的保留。这些不希望出现的干扰,如果被检测器观察到,就会表现为鬼峰、斑点、基线颠倒甚至是负峰。吸收的杂质可能对保留机制产生负面影响(缩短保留)或开始作为新的固定相(增加保留)。
HPLC 色谱柱是 HPLC 系统的关键部件,需要小心处理和保护。HPLC 系统的高效运行取决于流动相和样品是否不含化学杂质或固体悬浮液。频繁更换色谱柱的成本很高,因此您的目标应该是最大限度地延长色谱柱的使用寿命,以便每次都能获得所需的准确度和一致性结果。
二、延长色谱柱寿命的的解决措施是什么?
当然是使用保护柱! 保护柱会过滤所有的颗粒,积累非特异性的吸附物质,也会延长在微碱性pH值下使用的分析柱的寿命。但需要注意的是,保护柱的颗粒最好与分析柱的颗粒大小相同、材料类型相同、压力规格也应与主柱相匹配。还有就是,什么时候更换保护柱比较好呢?一般建议是当样品的性质发生变化时,当背压增加约10%-15%时,或按计划/时间更换保护柱(例如,每200-500次注射–取决于注射量和样品的纯度)。保护柱对于任何从事色谱工作的分析员来说都很熟悉,保护柱是一种典型的色谱耗材,它安装在主柱前面,通过收集和捕获颗粒或不可逆结合物质来保护主柱免受来自样品、基质或洗脱液的杂质的影响。它延长了更昂贵的主柱的生命周期并且作为更便宜的组件,更换更频繁。
三、液相保护柱的注意事项:
1.注意每次操作时都要按照标注方向来使用。
2.不使用保护柱会使分析柱或制备柱直接受到污染,从而缩短其实际使用寿命。
3.选择保护柱体积可按照色谱柱体积的5~10%即可。
4.选择保护柱柱芯的填料最好和色谱柱内的填料相同。
恒谱生保护柱为色谱柱提供方便、经济和有效的保护,延长了液相色谱柱的寿命,保证分析结果的重现性。随着使用时间的增加,液相色谱柱分离效能下降,柱压增高,其原因主要是由于色谱柱进口段的少量色谱硅胶填料被污染引起的,而色谱柱整个柱床并未被破坏,使用色谱柱保护柱,相当于在色谱柱前增加了一段额外的填料,起到了保护整个色谱柱的作用。
今天恒谱生分享的知识先到这啦,希望对您的工作有所帮助!