80.0浮游菌检测标准操作规程（SOP）
时间：2014-11-24 阅读：941
80.0操作规程（SOP）
| 文件名称 | 浮游菌检测标准操作规程 | 页 次 | 共4页 第1页 | ||
| 编制依据 | 药品生产质量管理规范（1998年修订） | 文件编码 | | ||
| 起 草 人 | | 审核 人 | | 批 准 人 | |
| 起草日期 | | 审核日期 | | 批准日期 | |
| 颁布部门 | 行政部 | 执行日期 | | ||
| 分发部门 | 质量控制部质量保证部 | ||||
目 的：建立洁净（区）室浮游菌检测标准操作规程。
范 围：适用于洁净（区）室浮游菌监测。
责 任：QC人员负责实施，QA人员负责监督。
内 容：
1取样前准备工作：
1.1 依据检测区域的取样点数按照《培养基配制、灭菌标准操作程序》制备适量的营养琼脂培养基。
1.2 在超净工作台内，以无菌操作法将配制好的营养琼脂培养基以每皿约15ml的装量分装，待培养基凝固后移出洁净区。
1.3 将制备的营养琼脂平皿倒置于隔水式恒温水浴培养箱内于30～35℃培养48小时。取出逐个检查，确认无菌落数后即可使用。
1.4采样：将上述制备好的营养琼脂平皿交与QA人员取样。
2.仪器、和培养基：
2.1所用的仪器、设备和培养基：
2.1.2
2.1.3培养皿（φ90mm×15mm）
2.1.4 培养基（营养琼脂培养基）
2.1.5恒温培养箱
2.2 仪器、设备、培养基的要求：
2.2.1 浮游菌采样器：
2.2.1.1 浮游菌采样器必须要有流量计和定时器。
2.2.1.2 应严格按仪器说明书的要求进行操作。
2.2.1.3 采样器必须按仪器的检定周期，定期对仪器作检定，以保证测试数据的可靠性，检验项目有：定时器，转盘转速，流量计。
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| 文件编码 | | ||
1.2.1.4 每次测试前应先接通电源，启动真空抽气泵，然后调节流量计和定时器。
2.2.1.5 空气采样量根据需要选定，已知采样器的流量（L/min）,设定采样时间（min）两者相乘即得采样量（L）。
2.2.1.6 采样口必须用便于消毒及化学性能稳定的材料制造，采样管严禁渗漏，内壁应光滑，采样管的长度应根据测定点的高度定，尽量减少弯曲。
3. 测试方法：
3.1 测试用仪器、培养皿表面必须严格消毒。
3.1.1 采样器进入被测房间前先用消毒剂灭菌。
3.1.2 用消毒剂擦净培养皿的外表面。
3.1.3 采样前，先用消毒剂消毒采样器的顶盘、转盘以及罩子的内外面，采样结束再用消毒剂轻轻喷射罩子的内壁和转盘。
3.1.4 采样口及采样管使用前必须高温灭菌，如用消毒剂对采样管的外壁、内壁进行消毒，应将管中的残留液倒掉并晾干。
3.1.5 采样者应穿戴与被测洁净区域相应的工作服，在转盘上放入或调换培养皿前，双手用消毒剂消毒。
3.2 采样程序：
3.2.1 仪器经消毒后先不放入培养皿，开动真空泵抽气，使仪器的残余消毒剂蒸发，时间不少于5min，并调好流量、转盘转速。
3.2.2 关闭真空泵，放入培养皿，盖上盖子后调节采样品缝隙高度。
3.2.3 置采样器于采样点后，开启采样器、转动定时器，根据采样量设定
采样时间。
4 测试规则：
4.1 测试状态：
4.1.1 浮游菌测试前微生物限度检查室已经消毒过。
4.1.2 测试状态为静态测试，并在报告中注明测试状态。
4.2 测试人员：
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| 文件编码 | | ||
4.2.1 测试人员必须穿戴符和被测环境级别的工作服。
4.2.2 静态测试时，室内人员不得多于2人。
4.3 测试时间：
4.3.1 对单向流，测试应在净化空调系统正常运行不少于10min后开始。
4.3.2 对非单向流，测试应在净化空调系统正常运行不少于30min后开始。
4.4 zui少采样点数目及其布置，zui小采样量，见下表:
| 面积（m2） | 洁净度级别 | |||||
| A | B | C | ||||
| 验证 | 监测 | 验证 | 监测 | 验证 | 监测 | |
| ＜10 | 2～3 | 1 | 2 | 1 | 2 | -- |
| ≥10～＜20 | 4 | 2 | 2 | 1 | 2 | -- |
| ≥20～＜40 | 8 | 3 | 2 | 1 | 2 | -- |
| ≥40～＜100 | 16 | 4 | 4 | 1 | 2 | -- |
| ≥100～＜200 | 40 | -- | 10 | -- | 3 | -- |
| ≥200～400 | 80 | -- | 20 | -- | 6 | -- |
| 400 | 160 | -- | 40 | -- | 13 | -- |
4.4.1 工作区测点位置离地0.8m～1.5m左右，送风口测点位置离开送风面30cm左右；可在关键设备或关键工作活动范围处增加测点。
4.4.2 每个采样点一般采样一次
4.4.3 对于单向流或送风口，采样器采样管口朝向应正对气流方向；对于非单向流，采样管口向上。
4.4.4布置采样点时，至少应离开尘粒较集中的回风口1m以上。
4.4.5采样时，测试人员应站在采样口的下风侧。
5 培养：取样结束后将平皿复倒置隔水式恒温水浴培养箱内于30～35℃培养48小时。并以未采样的营养琼脂平皿作对照皿。
6菌落计数：
6.1用肉眼直接计数，然后用5-10倍放大镜检查，是否遗漏。
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6.2 若培养皿上有2个或2个以上菌落重叠，可分辨时，仍以2个或2个以上的菌落计数。计数：培养结束，将上述培养后的平皿取出，逐个点计菌落数，必要时用放大镜检查，并记录。
7 结果计算：
7.1 平均菌落数的计算见下式：
平均菌落数 m=
式中：m为该房间（或区域）的平均菌落数；
m1、m2‥‥‥mn为该房间（或区域）各取样点的菌落数；
N为培养皿总数
8 结论：
8.1 洁净室（区）内的平均菌落数必须低于所选定的评定标准。
8.2 若某洁净室（区）的平均菌落数超过评定标准，则必须对此区域先行消毒，然后重新测试两次，测试结果必须合格。