饲料中免疫球蛋白IgG的测定液相色谱法
时间:2014-12-01 阅读:584
本标准规定了用液相色谱仪测定饲料中免疫球蛋白IgG含量的方法。本标准适用于配合饲料、浓缩饲料、含IgG的饲料原料(包括血浆等)中免疫球蛋白IgG的测定。zui低检出限为5μg(取样1g,zui低检出浓度为5mg/kg)。
原理:饲料中免疫球蛋白IgG的测定液相色谱法是根据亲和色谱的原理,在磷酸盐缓冲盐条件下免疫球蛋白IgG与配基相连,在PH2.5的盐酸*条件下洗脱免疫球蛋白IgG。
试剂:
磷酸二氢钾 ,*, IgG标准液,流动相A(PH6.5,0.05mol/l磷酸盐缓冲液),流动相B(PH2.5,0.05mol/l*盐酸缓冲液),
仪器:
液相色谱仪(具紫外检测器和梯度洗脱装置). 色谱工作站, 进样阀,实验室常用仪器设备,PH计 ,匀浆机 ,超纯水装置。
色谱条件:
色谱柱:Pharmacia HI-Trap Protein G柱,1ml
波长:280nm
进样量:20ul
流动相:流动相A=PH6.5 0.05mol/l磷酸盐缓冲液 流动相B=PH2.5 0.05mol/min*盐缓冲液
时间 流速ml/min 流动相A% 流动相B%
0-4.5 0.5 100 0
4.5-15.0 0.5 0 100
15.0-26.0 0.5 100 0