产品描述:

SFRE Medium 199是对M199培养基的改良，用于原代狒狒肾(Bak)细胞的生长和维持。培养基在M199培养基基础上添加了胰岛素、丙酮酸钠、硫酸锌，并升高了*-盐酸、半*、*、L -*、L -*、*、*、*和葡萄糖的浓度，使其实现大的无毒活性。SFRE 199 -2还添加了半乳糖，以避免乳酸过度积累，并使pH值在细胞延长的维持期内，保持在生理范围。

AT090是SFRE 199-2培养基，含有Earle's盐、L-*、半乳糖和葡萄糖。它不含胰岛素，因此在使用前必须单独添加。对于不同的细胞系，建议用户查阅相关文献，以了解细胞所需的培养基添加成分和生理生长的需求。

培养基组成：

成分           mg / L

无机盐

二水氯化钙265.000

无水硝酸铁0.720

无水*97.720

氯化钾400.000

醋酸钠50.000

氯化钠6800.000

无水*122.000

硫酸锌七水合物0.100

氨基酸

*100.000

羟*10.000

L-*25.000

L-*盐酸盐150.000

L-天冬氨酸30.000

L-半*（游离碱）4.000

L-*75.000

L-*300.000

L-*盐酸盐一水合物40.000

L-异*20.000

L-*60.000

L-赖氨酸盐酸盐70.000

L-蛋氨酸15.000

L-苯*25.000

L-*40.000

L-*25.000

L-*30.000

L-*10.000

L-*二钠盐116.000

L-*25.000

维生素

钙化醇  0.100

氯化*0.500

D-*0.010

D-Ca-泛酸盐0.010

DL-生育酚磷酸二钠盐0.010

*0.010

L-抗坏血酸0.050

*3 0.016

*0.025

*0.025

吡哆醛盐酸盐0.025

盐酸吡哆醇0.025

*醋酸酯0.140

核黄素0.010

盐酸硫胺素0.010

肌醇 0.050

对氨基苯甲酸（PABA）0.050

其他

硫酸腺嘌呤10.000

磷酸一腺苷1.000

三磷酸腺苷0.200

*0.200

D（+）半乳糖无水1000.000

D-葡萄糖2000.000

脱氧核糖0.500

*减少0.050

盐酸*0.300

次黄嘌呤0.354

酚红10.000

聚*酯80 4.900

核糖0.500

丙酮酸钠150.000

胸腺嘧啶0.300

*0.300

黄嘌呤0.344

使用方法:

1. 将12.1g悬浮在900ml的组织培养级水中，持续温和搅拌，直到粉末*溶解。不要加热水。

2. 加入2.20g*粉末（TC230）或29.3ml的7.5％*溶液（TCL013）用于制备1L培养基，并搅拌至溶解。

3. 用1N HCl或1N NaOH将pH调低所需pH值的0.2-0.3 pH单位，因为过滤时pH值会升高。

4. 用组织培养级别水将终体积补足至1000ml。

5. 培养基过滤除菌。采用正压而非真空将培养基通过0.22微米或更小的无菌膜过滤器。正压可减少二氧化碳的丢失。

6. 根据需要，无菌补充无菌添加剂。将无菌培养基分装至无菌容器中。

7. 将液体培养基保存在2-8°C，避光。

所需材料但未提供：

组织培养级水（TCL010）

*（TC230）

*溶液，7.5％（TCL013）

1N盐酸（TCL003）

1N氢氧化钠（TCL002）

胎牛血清（RM1112 / RM10432）

质量控制：

外观

灰白色至乳白色均匀粉末。

可溶性

12.1 g / L的透明溶液。

不含*的pH值

4.70-5.30

用*调节pH

7.20 -7.80

不含*的渗透压

260.00 -300.00

含*的渗透压

300.00 -340.00

培养反应

培养基的促生长能力通过细胞形态分析进行定性评估，通过细胞计数及对照品的比较进行定量评估。细胞至少传三代。

内毒素含量

不超过5EU / ml

储存和保质期：

1.所有干粉培养基和制备好的液体培养基应储存在2-8°C，在效期之前使用。尽管按*条件储存，个别干粉培养基在某些情况下可能会出现变质/降解的迹象。这通过颜色的变化、外观的变化、颗粒物的存在和溶解后的浑浊表现出来。

2. 不建议制备浓缩培养基。在浓缩培养基中，溶解性较差的游离碱性氨基酸和盐复合物含量可能发生沉淀。

3. 制备好的培养基的pH值和*浓度是影响细胞生长的关键因素。这也受培养基的量和培养容器体积(表面体积比)的影响。例如在大瓶如Roux瓶中，随着相当体积的CO2释放，pH值会明显上升。因此，对于每种细胞类型，必须确定pH值、*浓度、表面体积比的条件。我们建议严格监测pH值。如果需要，可用无菌的1N HCl或1N NaOH或充二氧化碳来调pH值。

4. 如需要，可在过滤除菌前或除菌后在培养基中补充添加剂，注意无菌防护措施。培养基的保质期将取决于加入培养基中的添加剂的性质。