DH10B 电击感受态细胞
DH10B Electroporation-Competent Cell

DH10B 电击感受态细胞基因型：

F- mcrA (mrr-hsdRMS-mcrBC) 80lacZM15 lacX74 recA1 endA1 araD139 (ara, leu)7697 galE15 g alK λ- rpsL nupG

DH10B 电击感受态细胞简要说明：

 High5TM 系列 DH10B 感受态细胞只能用于电击转化而不能用于热激转化。
 DH10B 菌株来源于 MC1061 菌株，mcrA、mcrBC 及 mrr 突变使 DH10B 菌株适合于克隆富 含甲基胞嘧啶或甲基腺嘌呤的 DNA (无论真核生物还是原核生物的基因组 DNA 都能被高效的转入 DH10B 中)。recA1 和 endA1 的突变有利于插入 DNA 的稳定和高纯度质粒 DNA 的提取。 φ80dlacZ∆M15 标记的存在使 DH10B 可用于蓝白斑筛选，rpsL 赋予其*抗High5TM 系列 DH10B 感受态细胞适用于大质粒的构建或者各种文库构建。High5TM 系 列 DH10B 感 受 态 细 胞 经 特 殊 工 艺 制 作 ， 经 pUC19 质 粒 检 测 ， 转 化 效 率>1010cfu/μg。
   DH10B 电击感受态细胞操作说明：
1. 0.1cm 电击杯和杯盖从储存液中拿出倒置于干净的吸水纸上 5 分钟，待其沥干水分，正置 5 分钟，使
乙醇充分挥发，待乙醇挥发干净立即插入冰中，压实冰面，电极杯顶离冰面 0.5 cm 以方便盖上杯盖，
冰中静置 5 分钟充分降温。
2. 取-80℃保存的  High5TM 系列 DH10B 感受态细胞放入冰浴中融化，加入 1 μl 目的 DNA (质 粒或连接产物)并用手 EP 管底轻轻混匀立即插入冰中。
A. 测定转化效率使用 1 μl 10 pg/μl 的对照质粒 pUC19；
B. 对于连接产物，请用乙醇沉淀 DNA 后适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重 悬，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。
3. 用 200 μl 枪头将感受态-质粒混合物快速移到电击杯中，避免产生气泡，盖上杯盖。
4. 启动电转仪，设置参数：C=25 μF，PC=200 Ω，V=2.4 kV (此为 BioRad 电转仪*参数，使用者也 可按所用电转仪*的参数操作），将电击杯快速放入电转槽中，电击完成快速插入冰中。
5. 向电击杯中加入 700 μl 不含抗生素的无菌培养基 S.O.C.，混匀后转移到空 EP 管中，37℃，200 rpm
复苏 60 分钟。
6. 5000rpm 离心一分钟收菌，重悬后取 100-200 μl 涂布到含相应抗生素的 2YT 或 LB 培养基上。将平 板倒置放于 37℃培养箱过夜培养。如果进行蓝白斑筛选操作，将平板放 37℃培养至少 13h。
  DH10B 电击感受态细胞注意事项：

1.  加入质粒时体积不应大于感受态体积的 1/10。
2.  当质粒不纯或存在盐，乙醇，蛋白及缓冲液等污染时，转化效率急剧下降。
3.    若转化大质粒或想获得较高转化效率，*使用高纯质粒提取试剂盒提取质粒。质粒增大一倍，转 化效率下降一个数量级。
4. 对于连接产物转化，转化前用乙醇沉淀 DNA 后适量 TE 缓冲液 (10 mM Tris HCl, pH7.5; 1 mM EDTA)重悬产物，保证 DNA 浓度不超过 100 ng/μl。过高浓度连接产物或过大体积连接产物会降低转化 效率，增加打火的风险。
5.  混入质粒时应轻柔操作。
6.  转化高浓度的质粒可相应减少终用于涂板的菌量。
 

  DH10B 电击感受态细胞其他*：
DH5α感受态细胞 *0感受态细胞 *0F′ 感受态细胞 Mach1-T1感受态细胞 T1感受态细胞 JM109感受态细胞 JM110感受态细胞 XL1-Blue感受态细胞XL2-Blue感受态细胞 DB3.1感受态细胞 Stbl2感受态细胞 Stbl3感受态细胞 XL10-Gold感受态细胞 TG1感受态细胞 HB101感受态细胞 SURE感受态细胞 DH10B感受态细胞 DH10Bac感受态细胞 BJ5183感受态细胞BJ5183-AD-1感受态细胞 Stable感受态细胞 Turbo感受态细胞 F-DH5α感受态细胞 F-*0感受态细胞 DH5a 电转化感受态细胞 *0 电转化感受态细胞 SURE 电转化感受态细胞  BJ5183 电转化感受态细胞 BJ5183-AD-1 电转化感受态细胞 DH10B 电转化感受态细胞 XL1-Blue 电转化感受态细胞 stable 电转化感受态细胞 TG1 电转化感受态细胞EPI400感受态细胞 EPI400 电转化感受态细胞 BL21感受态细胞 BL21(DE3)感受态细胞 BL21(DE3)pLysS感受态细胞 BL21(AI)感受态细胞 BL21 Star(DE3)感受态细胞 BL21-Star(DE3)pLysS感受态细胞 BL21-CodonPlus (DE3)-RIPL感受态细胞 Rosetta(DE3)感受态细胞Rosetta-gami(DE3)pLysS Chemically Competent Cell Rosetta-gami B(DE3)感受态细胞Rosetta-gami 2(DE3)感受态细胞 OrigamiB(DE3)感受态细胞 TB1感受态细胞 OverExpress C43(DE3)感受态细胞 Tuner(DE3)感受态细胞 ER2566感受态细胞 F-BL21(DE3)感受态细胞GV3101感受态细胞 EHA105感受态细胞 AGL1感受态细胞 LBA4404感受态细胞 EHA101感受态细胞 GV3101 电转化感受态细胞 EHA105 电转化感受态细胞 AGL1 电转化感受态细胞LBA4404 电转化感受态细胞 EHA101 电转化感受态细胞 Y1HGold感受态细胞 Y2HGold感受态细胞 AH109感受态细胞 Y187感受态细胞 EGY48感受态细胞 NMY51感受态细胞