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面议PCR前的核酸提取过程操作复杂,耗时、好礼,难以实现高通量操作,且易造成实验室气溶胶污染。本公司给予*的Direct Lysis试剂,开发了组织细胞直接扩增技术,可不用提取核酸,对组织或细胞样本简单处理后,直接进行PCR、RT-PCR、qPCR以及RT-PCR。该系列试剂盒可广泛应用于基因克隆、转基因或基因敲除鉴定、基因表达分析、病毒诊断等PCR相关的各种实验。
产品优势:
低样本量:样品用量小,20-40ul即可满足需求
快捷:30min内制备模板,无需其他设备
高效:经反复验证,可有效扩增组织细胞中长达1800bp的DNA和RNA的片段
直接:无需柱纯化、步骤简单,降低气溶胶产生
高通量:能够在96孔板或8联管中操作
RNA direct:RNA也可进行直接扩增,同类产品少,且对比竞品效果优
产品名称:EZ®细胞及动物组织DNA直扩PCR试剂盒
英文名称:EZ Cell and Tissue DNA Direct PCR Kit
产品货号:EZ010-01/EZ010-02
产品规格:50T/200T
产品价格:420/1350元
试剂盒应用:
动物组织或细胞DNA的扩增与克隆、转基因细胞株筛选、DNA病毒基因扩增、DNA病毒普通PCR诊断、DNA病毒Real-time PCR诊断(Taqman法)等。
试剂盒组成:
DNA-EZ-1、DNA-EZ-2、DNA-EZ-3、2×TaqMix、H2O
保存条件:
-20ºC保存。使用前将DNA-EZ-1、DNA-EZ-3在室温或37ºC充分溶解。DNA-EZ-2和2×TaqMix需置于冰上。
EZ®细胞及动物组织DNA直扩PCR试剂盒使用方法:
1、细胞或组织样品中DNA的扩增
1 将DNA-EZ-1与DNA-EZ-2以5:1的比例充分混合。
2 取20 µL细胞样品(105-106 cells/mL)或研磨的组织样品,加入6 µL上述混合液,混匀。
3 置于50ºC静置10分钟后,再置于95ºC加热10分钟。
4 加入50 μL的DNA-EZ-3,混匀。
5 取2 μL上述处理液进行PCR扩增。
2、组织块中DNA的扩增
1 用H2O将DNA-EZ-1稀释5倍,每25 μL的DNA-EZ-1稀释液加入1 μL的DNA-EZ-2,混合均匀。
2 切取半颗米粒大小的组织块(< 3 mm3),并*浸入上述混合液中。
3 50ºC加热30分钟,每隔10分钟取出混匀一次。
4 95ºC加热10分钟。
5 加入50 μL的DNA-EZ-3,混匀。
6 取2 μL上述处理液进行PCR扩增。
3、Real-time PCR
取上述细胞或组织处理液,加入特异性引物和Taqman探针,可进行特异性靶标DNA的定量检测。
取上述细胞或组织处理液,加入SYBR Green PCR试剂(需自备),可进行特异性靶标DNA的相对定量检测。
4、PCR加样体系
成分 | 25 μL体系(*) | 50 μL体系 |
2×TaqMix | 12.5 μL | 25 μL |
Forward Primer (10 μM) | 1 μL | 2 μL |
Reverse Primer (10 μM) | 1 μL | 2 μL |
Template DNA | 2 μL | 2 μL |
H2O | 8.5 μL | 19 μL |