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PCR新手指南

时间:2014-11-24      阅读:267

PCR的基本概念

聚合酶链式反应(Polymerase chain reaction,PCR)是一种分子生物学技术,用于体外扩增特定的DNA 片段。
PCR技术主要过程是,通过人类合成的一小断单链DNA 片段(叫做引物)与模板DNA 特定的区域特异性结合,进而以四种dNTP为底物,通过DNA聚合酶沿着引物和模板形成的双链部分的3’端聚合形成DNA 片段实现DNA 体外扩增的过程。其中,zui重要的是热稳定的DNA聚合酶,由于该酶在97度以上的高温也能保持稳定,所以我 们可以通过94~97度这个温度范围内处理DNA形成单链,然后降温(根据引物不同而有差异,一般为50-55度)直至适量的引物结合到模板上。zui后温度提升至72度,聚合酶聚合形成双链DNA。

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