核酸浓度检测指南(一)
时间:2017-03-20 阅读:971
对于从事 DNA、RNA 或蛋白质相关研究的科学家而言, 经常需要对起始核酸/蛋白样品进行质量评估,未进行样品质控将可能导致数据差错,得出错误结论。如 qPCR 等分子生物学技术沿用较小体积样品,因此这些样品的质量至关重要,且有的应用(如: NGS 的文库制备)需要进行准确的浓度检测以进行后续的均一化。
Micro Drop为一款全光谱波长(185~910nm)超微量分光光度计,兼具基座和比色皿上样双检测模式, 适用于更宽浓度范围的样品检测,基座上样检测操作步骤仅需三步(微量移液器加样—平板电脑控制检测—无绒纸擦拭)即可完成,无需昂贵的耗材,也无需进行繁琐的清洗及稀释步骤,快速。
操作步骤
1、清洁:首先,用移液器滴加去离子水2 -3μl到Micro Drop下部样品基座,关闭上臂,确保上层基座与去离子水接触。停留30秒,用实验室洁净无绒纸将上样检测系统的上部和下部的光学表面擦拭干净。
2、打开Micro Drop软件,并选择核酸应用程序。用移液器滴加1μl缓冲液(溶解待测样品的液体)至样品基座光学表面,选择“空白检测”以执行空白测量。一旦空白测量完成后,用实验室洁净无绒纸将上样检测系统的上部和下部的光学表面擦拭干净。
3、输入样品编号,选择检测的样品类型(默认的设定为DNA,消光因子为50)。用移液器滴加样品0.5-2μl到Micro Drop下部样品基座,关闭上臂,选择“检测”,软件会自动计算出的核酸浓度和纯度比例,3-5秒内,即可显示实验结果及光谱图。
每个样品测量完成后,用实验室洁净无绒纸将上样检测系统的上部和下部的光学表面擦拭干净,即可进行下一个样本的检测。(建议连续使用Micro Drop约30min后再次进行一次空白检测)。所有检测结束后,重复步骤1,清洁样品检测台。
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