安捷伦液相色谱仪HPLC分析六味地黄丸含量
 

　　六味地黄丸，滋阴补肾。用于肾阴亏损，头晕耳鸣，腰膝酸软，骨蒸潮热，盗汗遗精。主要成分为熟地黄、酒萸肉、牡丹皮、山药、茯苓、泽泻。
 

　　有关六味地黄丸制剂的各成分的含量测定方法如下：
 

　　一、山茱萸：
 

　　色谱条件与系统适用性试验：十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以四氢呋喃-乙腈-甲醇-0.05%磷酸溶液(1：8：4：87)为流动相；检测波长为236nm，柱温40℃。理论板数按马钱苷峰计应不低于4000。
 

　　供试品溶液的制备：取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取约0.7g，精密称定；或取重量差异检查项下的大蜜丸，剪碎，取约0.1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇25ml，密塞，称定重量，超声提取(功率250W，频率33kHZ)15分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重 量，摇匀，滤过。精密量取续滤液10ml，置中性氧化铝柱(100～200目，4g，内径1cm，干法装柱)上，用40%甲醇适量使溶解，并转移至 10ml量瓶中，加50%甲醇稀释至刻度，摇匀，即得。
 

　　二、牡丹皮
 

　　色谱条件与系统适用性试验：以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以甲醇-水(70：30)为流动相；检测波长为274nm。理论板数按丹皮酚峰计应不低于3500。
 

　　供试品溶液的制备：取本品水蜜丸或小蜜丸，切碎，取约0.3g，精密称定；或取重量差异检查项下的大蜜丸，剪碎，取约0.4g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50%甲醇50ml，密塞，称定重量，超声提取(功率250W，频率33kHZ)45分钟，放冷，再称定重量，用50%甲醇补足减失的重 量，摇匀，滤过，取续滤液，即得。
 

　　三、单皮酚
 

　　Waters2695液相色谱仪；色谱柱为HypersilODS2柱(205mm×4.6mm,5μm)；流动相为甲醇 -2%冰醋酸(55：45)；流速为1.0mL/min；检测波长为275nm；柱温25℃。样品用甲醇超声提取后经Sep-PakC18微柱处理，收集 第12～14mL流出液。
 

　　四、墩果酸、熊果酸
 

　　Agilent液相色谱仪1200；色谱柱为Shim-PackC18分析柱 4.6mm×150mm,5μm；流动相为乙腈-甲醇-水-乙酸胺70：16：14：0.5；流速1mL/min；检测波长215nm；柱温为室温。样品 处理方法：六味地黄丸(浓缩丸)用水溶解并过滤后，用乙迷加热回流提取，残渣用石油醚(30～60℃)浸泡，弃去石油醚液，残渣用甲醇溶解并定容。
 

　　五、马钱素
 

　　Waters510液相色谱仪；色谱柱为YWG-C18柱(150mm×4.6mm,5μm)；流动相为甲醇-水(1：4)；流速为0.8mL/min；检测波长为238nm。样品用甲醇超声提取。