安捷伦气相色谱仪研究大黄鱼中多种残留农药
 

　　1试验部分
 

　　1.1 仪器与试剂
 

　　Agilent-7890B气相色谱仪(美国Agilent 公司)，配有电子捕获检测器(μECD)和火焰光度检测器(FPD)； 色谱柱：D B-17M S 毛细管柱，30m ×250μm ×0.25μm(美国J& W 公司)；离心机；旋涡混合器(德国IK A 公司)；恒温气浴振荡摇床(德国IK A 公司)；固相萃取装置(美国SU PELCO 公司)；氮吹浓缩仪；ENVI-18 固相萃取小柱(美国SU PELCO公司)。
 

　　标准溶液：由中国农业部环境保护科研监测所研制(浓度均为l00 μg/m L)；所用溶剂中除乙酸乙酯、正己烷为色谱纯外，其余为分析纯，其中中性氧化铝填料于使用前400℃烘烤2 h，降温后备用，无水疏酸钠于使用前需650℃烘烤4 h，降温后保存在干燥器内备用；水为三重过滤去离子水。
 

　　1.2 实验方法
 

　　1.2.1 提取方法。
 

　　称取10 g 试样置于50 m L 离心管中，加入4 m L 水，加入4 g 氯化钠，接着加入8 m L乙腈溶液，旋涡混合1m in，放在恒温气浴振荡摇床上振荡15 m in，4500 r/m in 离心5 m in，上清液按1.2.2 方法进行净化，残渣中再加入5 m L 乙腈溶液提取一次，上清液也按1.2.2 方法进行净化。
 

　　1.2.2 净化方法。
 

　　在EN V I-18 固相萃取柱上端依次填入约5 m m 高的中性氧化铝填料，再填入约5 m m高的无水硫酸钠，用4 m L 乙腈预淋洗柱子，弃去流出液，然后将上述1.2.1 的上清液慢慢转移至柱中，收集全部流出液于15 m L 离心管中，于40℃下氮吹至近干，zui后准确移取1 m L 乙酸乙酯-正己烷(体积比1:1，色谱纯)定容洗脱，过膜，装入进样瓶，分别供G C-μECD 和G C-FPD 分析。
 

　　1.2.3 仪器参数与测定条件
 

　　1.2.3.1 有机磷类农药(以下简称第Ⅰ组)，用G C-FPD 来测定。色谱柱：D B-17M S 石英毛细管柱，30 m×250μm×0.25μm ；柱升温程序：100 ℃保持1 m in，以10 ℃/m in 升至120 ℃，再以15 ℃/m in 升至190 ℃，然后以6℃/m in 升至230 ℃，zui后以30℃/m in 升至290 ℃保持7 m in；进样口温度：240 ℃；检测器(FPD)温度：240 ℃；氢气：75 m L/m in；空气：100 m L/m in；载气：氮气，纯度大于等于99.99% ，流量50 m L/m in；进样量：2 μL。在上述色谱条件下农药标准品、大黄鱼样品以及样品添加混合标准溶液的色谱见图1。
 

　　1.2.3.2 有机氯和拟除虫菊酯农药(以下简称第Ⅱ组)，用G C-μECD 来测定。色谱柱：D B-17M S 石英毛细管柱，30 m×250 μm ×0.25 μm ；柱升温程序：80 ℃保持1 m in，以20 ℃/m in 升至240 ℃保持3 m in，再以10 ℃/m in 升至260 ℃保持4 m in，zui后以10 ℃/m in 升至290 ℃保持9 m in；进样口温度：240 ℃；检测器(μECD)温度：310 ℃；载气：氮气，纯度大于等于99.99% ，流量50 m L/m in；进样量：2μL。在上述色谱条件下农药标准品、大黄鱼样品以及样品添加混合标准溶液的色谱见图2。
 

　　2 安捷伦气相色谱仪研究大黄鱼中多种残留农药结果与分析
 

　　2.1 样品前处理条件的选择
 

　　2.1.1 提取。
 

　　对于动物源性食品中的农药残留，一般认为用脂溶性溶剂将油脂一起提取出来，提取效率比较高，但该方法会同时带出大量杂质，给净化带来困难。乙腈作为一种通用的提取溶剂在药物残留检测方面得到了广泛的运用，乙腈对大多数农药均有较好的溶解度且脂肪在乙腈中的溶解度较小，而且乙腈与净化时的固相萃取柱相相匹配，无需浓缩可直接过柱，因此本研究考虑使用乙腈作为提取溶剂。但由于单纯使用乙腈提取时，鱼肉会凝结在一起不利于有机溶剂在水产品组织中的渗透提取。实验发现加入4 m L 水，可以增加乙腈对肌肉的渗透性，鱼肉组织得到*分散，有利于提高提取效率，而同时加入氯化钠使蛋白质与氯化钠相互作用，从而肌肉组织呈稀泥状，整个提取体系状态非常均一，利用氯化钠的盐析作用，高速离心使水相和有机相分离，以除去水和水溶性杂质，同时还可减少提取液中的干扰基质含量并提高待测物在乙腈相中的分配比。离心后的溶液偶有乳化现象，可振摇几下再离心，即可消除乳化。
 

　　2.1.2 净化。
 

　　Envi-18 柱的硅胶上接有十八烷基，有较高的相覆盖率和碳含量，对非极性物质有较高的容量，Envi-18 柱配合乙腈作为正相柱使用，同时结合中性氧化铝一起作用，对油脂的去除有十分显著的效果，同时还可以除去大部分弱极性的杂质。在柱上装入无水硫酸钠，预先除去提取液中残余的极少量水分。提取液过柱后呈无色透明，净化效果良好，且对多种有机氯、拟除虫菊酯、有机磷三种不同类型的农药均有满意的回收率。而且本方法的提取液不必浓缩，可直接过柱，操作简便。
 

　　2.2 方法的线性范围、定量下限、回收率和精密度
 

　　根据14 种农药在气相色谱仪中的响应值和各进出口国*，确定各种农药在混合标准储备液中的浓度，其中α- 硫丹、β- 硫丹、硫丹硫酸盐0.005 μg/m L，其余11 种农药均为0.05 μg/m L。再由混合标准储备液稀释成5 个不同浓度的混合标样，用气相色谱进行分析，以峰面积对质量浓度做线性回归分析，线性方程和相关系数见表1 和表2。用本方法对大黄鱼添加水平为0.001~0.01 m g/kg 的标准品进行平行6 次实验，其中α 硫丹、β 硫丹、硫丹硫酸盐的定量下限(S/N≥10)为0.001 m g/kg，其余各项目的定量下限均小于0.01 m g/kg。方法平均回收率为63% ～110% ，相对标准偏差为4.1% ～10.5% ，结果较为理想。
 

　　3安捷伦气相色谱仪研究大黄鱼中多种残留农药结论
 

　　本文以脂肪含量较高的大黄鱼为研究对象，建立了用一种前处理方法同时检测大黄鱼中多种有机氯、拟除虫菊酯和有机磷类农药残留量的分析方法。该方法的步骤简单、试剂用量少、效果良好，方法回收率及精密度均符合残留分析要求，适合于监控大黄鱼中的多种农药残留。通过喂养的方式给药，分析农药在鱼体内代谢和残留情况，这有待于今后进一步实验研究。