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毛细管电泳仪常见故障处理方法(一)

发布时间:2020/8/6 13:30:30
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  【仪器网 解决方案】毛细管电泳又称高效毛细管电泳,是一类以毛细管为分离通道、以高压直流电场为驱动力的新型液相分离技术。毛细管电泳仪的主要部件包括直流高压电源、毛细管、电极和电极槽、冲洗进样系统、检测系统和数据处理系统等。
 
  一、电流不稳定
 
  波动或无电流
 
  可能原因及处理方法:
 
  1、毛细管中形成气泡,冲洗毛细管,升高电压以限制初始加热或对缓冲液脱气。
 
  2、毛细管堵塞,用吸收溶液(如NaOH)冲洗毛细管,当观察200nm的在线信号时,应该看到基线上有“台阶”,如果仍然堵着,用注射器或高压气体手动冲洗。
 
  3、毛细管断裂,更换毛细管
 
  4、缓冲液瓶中没有缓冲液或者装错缓冲液,灌装/改变缓冲液瓶。
 
  5、大体积进样,正常情况下分析过程中电流应该保持稳定。
 
  二、基线不稳定
 
  1、基线有毛刺
 
  (1)缓冲液沉淀,采用0.2或0.45μm的滤膜过滤缓冲液。
 
  (2)缓冲液中有微小的气泡,用超声波或真空对缓冲液进行脱气。
 
  (3)样品沉淀验证样品组分在缓)中液中有足够的溶解度。
 
  2、基线噪声大
 
  (1)毛细管接口中的狭缝堵塞,用甲醇或水清洗狭缝。
 
  (2)氘灯老化,使用DAD测试来测定氘灯的光强度和工作时间,若必要就更换新的氘灯。
 
  (3)数据采集速率太高,确定峰宽,需要的话降低采集速率
 
  (4)参比波长设置不合适,分析过程中采集1^光谱图,在不影响样品吸收的情况下采用尽可能低的波长,并采用宽的带宽。
 
  (5)缓冲液在检测波长有吸收,使用UV吸收低的缓冲液,如磷酸盐和硼酸盐特别是在低于210nm检测时。
 
  3、基线飘移
 
  (1)毛细管准直定位不合适,重新在检测器块中安装毛细管卡套。
 
  (2)温度未平衡,打开顶盖之后要有10-20分钟的平衡时间。
 
  (3)氘灯刚刚开启,开启氘灯后要有15-30分钟的平衡时间。
 
  三、分离效率差
 
  1、宽色谱峰
 
  (1)样品超载,降低样品浓度或进样量。
 
  (2)过量的焦耳热,降低电压、缓冲液电导或毛细管内径。
 
  2、变形的色谱峰
 
  (1)样品和缓冲液的离子淌度不匹配,调节淌度或增大缓冲液和样品的电导差异。
 
  (2)样品超载,降低样品浓度或进样量。
 
  3、峰拖尾
 
  样品吸附到毛细管壁,使用聚合物添加剂或涂层毛细管。

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