一招教会你如何使用分光光度计
- 发布时间：2020/11/26 23:17:42
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一招教会你如何使用分光光度计
使用分光光度计的步骤与方法
1.预热仪器：
为使测定稳定，将电源开关打开，使仪器预热20min，为了防止光电管疲劳，不要连续光照。预热仪器时和在不测定时应将比色皿暗箱盖打开，使光路切断。
2.选定波长：
根据实验要求，转动波长调节器，使指针指示所需要的单色光波长。
3.固定灵敏度档：
根据有色溶液对光的吸收情况，为使吸光度读数为0.2～0.7，选择合适的灵敏度。为此，旋动灵敏度档，使其固定于某一档，在实验过程中不再变动。一般测量固定在“1”档。
4.调节“0”点：
轻轻旋动调“0”电位器，使读数表头指针恰好位于透光度为“0”处(此时，比色皿暗箱盖是打开的，光路被切断，光电管不受光照)。
5.调节T=100%：
将盛蒸馏水(或空白溶液或纯溶剂)的比色皿放入比色皿座架中的第1格内，有色溶液放在其它格内，把比色皿暗箱盖子轻轻盖上，转动光量调节器，使透光度T=100%，即，表头指针恰好指在T=100%处。
6.测定：
轻轻拉动比色皿座架拉杆，使有色溶液进入光路，此时表头指针所示为该有色溶液的吸光度A，读数后，打开比色皿暗箱盖。
7.关机：
实验完毕，切断电源，将比色皿取出洗净，并将比色皿座架及暗箱用软纸擦净。
分光光度计的检验小妙招
1.波长准确度的检验：
分光光度计在使用过程中，由于机械振动、温度变化、灯丝变形、灯座松动或更换灯泡等原因，经常会出现刻度盘上的读数与实际通过溶液的波长不符合的现象，因而导致仪器灵明度降低，影响测定结果的精度，需要进行检验。
检验波长准确度简-单的方法是用干涉滤光片或镨钕滤光片测量仪器的吸收峰值, 如果测出的值与滤光片标准值之差超出规程规定，则需要进行波长调节。
2.透射比正确度的检验：
用透射比标准值分别为10 %、20 %、30 %左右的光谱中性滤光片，可见光区分别在440、546、635nm波长处，以空气为参比，分别测量各滤光片的透射比，紫外光区用重铬酸钾溶液分别在235、257、313、350nm波长处，以高氯酸溶液为参比，测量其透射比。
3.稳定度的检验：
在零点不受光的条件下，用零点调节器将仪器调至零点，观察3分钟读取透射比的变化，即为零点稳定性。在仪器测量范围两端向中间靠10nm处，调节零点后，盖上样品室盖(打开光门)，使光电管受光，调节透射比为95%(数显仪器调至100%)察3分钟读取透射比的变化，为光电流稳定性。
4.光的检验：
可见分光计棱镜式仪器在420nm处，光栅式仪器在360nm处，紫外分光计在220nm处分别用符合规定的截止滤光片，以空气为参比，测量其透射比值，即为仪器在相应波长下的杂散辐射率。
分光光度计的维护和保养
分光光度计是精密仪器，正确安装、使用和保养对保持仪器良好的性能和保证测试的准确度有重要作用。
1.对仪器工作环境的要求
分光光度计应安装在稳定的工作台上，(周围不应有强磁场, 以防电磁干扰)，室内温度应保持在(10～30)℃。室内应干燥，相对湿度宜控制在<85 %，室内应无腐蚀性气体，光线不宜过强。
2.仪器保养和维护方法
(1)仪器工作电压一般为220V，允许±10 %的电压波动。为保持光源灯和检测系统的稳定性，在电源电压波动较大的实验室配备稳压器。
(2)为了延长光源使用寿命，在不用时不用开光源灯。如果光源灯亮度明显减弱或不稳定，应及时更换新灯。更换后要调节好灯丝位置，不要用手直接接触窗口或灯泡，避免油污沾附，若不小心接触过，要用无水乙醇擦拭。
(3)单色器是仪器的核心部分，装在密封盒内，不能拆开，为防止色散元件受潮发霉，必须经常更换干燥剂。
(4)必须正确使用吸收池，保护吸收池光学面。
(5)光电转换元件不能长时间曝光，应避免强光照射或受潮积尘。
使用分光光度计都有什么注意事项？
1)为了防止光电管疲劳：
不测定时必须将比色皿暗箱盖打开，使光路切断，以延长光电管使用寿命。
2)比色皿的使用方法：
①拿比色皿时：
手指只能捏住比色皿的毛玻璃面，不要碰比色皿的透光面，以免沾污。
②清洗比色皿时：
一般先用水冲洗，再用蒸馏水洗净。如，比色皿被有机物沾污，可用盐酸-乙醇混合洗涤液(1:2)浸泡片刻，再用水冲洗。不能用碱溶液或氧化性强的洗涤液洗比色皿，以免损坏。也不能用毛刷清洗比色皿，以免损伤它的透光面。每次做完实验时，应立即洗净比色皿。
③比色皿外壁的水用擦镜纸或细软的吸水纸吸干：
以保护透光面。
④测定有色溶液吸光度时：
一定要用有色溶液洗比色皿内壁几次，以免改变有色溶液的浓度。另外，在测定一系列溶液的吸光度时，通常都按由稀到浓的顺序测定，以减小测量误差。
⑤在实际分析工作中：
通常根据溶液浓度的不同，选用液槽厚度不同的比色皿，使溶液的吸光度控制在0.2～0.7。